氯化镍对肉鸡法氏囊影响的病理学研究
本文关键词:氯化镍对肉鸡法氏囊影响的病理学研究
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【摘要】:本文的目的是研究氯化镍致肉鸡法氏囊的病理损伤。试验选用1日龄科宝肉鸡健雏280只,随机分成4组,每组70只,分别饲喂对照日粮和高镍日粮(高镍Ⅰ组:300 mg/kg,高镍Ⅱ组:600 mg/kg,高镍Ⅲ组:900 mg/kg,镍源:氯化镍,NiCl2),自由饮水。试验期为42天。试验第14,28和42天时,运用病理学、流式细胞术、荧光定量PCR和ELISA等方法观察了法氏囊病理损伤指标的改变,与对照组比较,取得以下结果:1.高镍组法氏囊体积减小、重量减轻。病理组织学观察见法氏囊皮质、髓质区淋巴细胞减少。2.高镍组法氏囊SOD、CAT、GSH-Px活性显著降低(P0.05或P0.01),抑制羟自由基能力显著下降(P0.05或P0.01),GSH含量显著降低(P0.05或P0.01),MDA含量显著升高(P0.05或P0.01);同时,CuZn-SOD、Mn-SOD、CAT、GSH-Px mRNA表达水平显著降低(P0.05或P0.01)。3.Go/G1期,高镍组法氏囊淋巴细胞百分比显著升高(P0.05或P0.01);S期,法氏囊淋巴细胞百分比显著降低(P0.05或P0.01);法氏囊淋巴细胞增值指数显著降低(P0.05或P0.01)。4.高镍组法氏囊淋巴细胞凋亡率显著升高(P0.05或P0.01);同时,Bax, Caspase-3,Cyt C,Apaf-1,Caspase-6,Caspase-7,Caspase-9 mRNA表达水平显著升高(P0.05或P0.01),Bcl-2 mRNA表达水平显著降低(P0.05或P0.01)。5.高镍组法氏囊和血清免疫球蛋白(IgG、IgM)含量显著降低(P0.05或P0.01)。结论:日粮氯化镍添加300 mg/kg及其以上时对肉鸡法氏囊产生免疫毒性,引发免疫功能降低。法氏囊发育受阻、细胞周期停滞、细胞凋亡和氧化损伤是法氏囊免疫功能受损的病理基础和分子基础;淋巴细胞和免疫球蛋白分泌减少则是法氏囊免疫功能受损的体现。
【关键词】:氯化镍 肉鸡 病理学 流式细胞术 荧光定量PCR
【学位授予单位】:四川农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S858.31
【目录】:
- 摘要5-6
- ABSTRACT6-8
- 缩写词表(ABBREVIATIONS)8-12
- 1 文献综述12-20
- 1.1 镍和氯化镍的理化性质12
- 1.2 生物体内镍的含量、分布及代谢12-13
- 1.3 镍的营养生理作用13-14
- 1.4 镍及其化合物对机体的毒性作用14-17
- 1.4.1 对代谢的影响14-15
- 1.4.2 对呼吸系统的影响15
- 1.4.3 对造血系统的影响15
- 1.4.4 对皮肤的影响15-16
- 1.4.5 对生殖及胚胎的影响16
- 1.4.6 对肝脏的影响16-17
- 1.4.7 对肾脏的影响17
- 1.5 镍及镍化合物的致癌性17-18
- 1.6 镍的免疫毒性18
- 1.7 镍缺乏对机体的影响18
- 1.8 线粒体凋亡途径相关因子18-20
- 2 研究目的及意义20
- 3 材料与方法20-27
- 3.1 试验材料20-22
- 3.1.1 试验动物及日粮20-21
- 3.1.2 主要仪器和试剂21-22
- 3.2 试验方法22-27
- 3.2.1 动物分组及饲养管理22
- 3.2.2 临床观察22
- 3.2.3 法氏囊病理学观察22-23
- 3.2.4 法氏囊细胞周期的检测23
- 3.2.5 法氏囊细胞凋亡的检测23-25
- 3.2.6 ELISA法检测IG含量25-26
- 3.2.7 法氏囊抗氧化指标检测26
- 3.2.8 荧光定量PCR法检测抗氧化酶mRNA表达水平26-27
- 3.3 试验数据分析27
- 4 结果27-48
- 4.1 临床观察27-28
- 4.2 病理学观察28-30
- 4.2.1 剖检变化28-30
- 4.2.2 组织学变化30
- 4.3 法氏囊细胞周期变化30-33
- 4.4 法氏囊细胞凋亡变化33-38
- 4.4.1 法氏囊细胞凋亡百分率变化33
- 4.4.2 法氏囊线粒体凋亡通路相关因子的mRNA表达结果33-38
- 4.5 法氏囊和血清IGA、IGG和IGM含量变化38-41
- 4.5.1 法氏囊IgA、IgG和IgM含量变化38-39
- 4.5.2 血清IgA、IgG和IgM含量变化39-41
- 4.6 法氏囊抗氧化指标的变化41-45
- 4.6.1 MDA含量变化41
- 4.6.2 组织抑制羟自由基能力变化41
- 4.6.3 GSH含量变化41
- 4.6.4 CAT活性的变化41-42
- 4.6.5 SOD活性的变化42
- 4.6.6 GSH-Px活性的变化42-45
- 4.7 法氏囊抗氧化酶MRNA表达水平的变化45-48
- 4.7.1 CuZn-SOD mRNA表达水平的变化45
- 4.7.2 Mn-SOD mRNA表达水平的变化45-46
- 4.7.3 CAT mRNA表达水平的变化46
- 4.7.4 GSH-Px mRNA表达水平的变化46-48
- 5 讨论48-50
- 5.1 临床症状48
- 5.2 氯化镍对法氏囊形态结构的影响48-49
- 5.3 氯化镍对法氏囊细胞凋亡的影响49
- 5.4 氯化镍对法氏囊氧化损伤的影响49-50
- 5.5 氯化镍对法氏囊和血液免疫球蛋白的影响50
- 6 结论与创新50-52
- 参考文献52-59
- 图版及说明59-64
- 致谢64-65
- 攻读学位期间发表的学术论文目录65
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