液相芯片技术同时检测六种猪繁殖障碍病毒的方法研究

发布时间：2017-11-05 01:03

  本文关键词：液相芯片技术同时检测六种猪繁殖障碍病毒的方法研究

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【摘要】：在GenBank中收集猪细小病毒(PPV)结构蛋白VP2基因、猪圆环病毒2型(PCV2)的ORF2序列、猪伪狂犬病毒(PRV)的gB基因、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的NSP2基因、猪瘟病毒(CSFV)的E2基因和乙型脑炎病毒(JEV)的M基因,利用Primer5.0等分子生物学软件对收集的序列分析比较,筛选出上述基因的特异保守序列并设计引物和探针,将设计好的探针与相应的微球偶联,优化条件,建立检测方法。结果表明:建立的检测PPV、PCV2、PRV、PRRSV、CSFV、JEV6种病毒核酸的多重液相芯片技术具有较好的特异性、敏感性和稳定性,对PPV、PCV2、PRV、PRRSV、CSFV、JEV6种病毒核酸的最低检出量分别为8.50×10~2copies/μL、2.87×10~2copies/μL、2.07×10~2copies/μL、2.61×10~2copies/μL、2.34×10~2copies/μL、2.05×10~2copies/μL,与相应病毒PCR/RT-PCR检测方法相比,敏感性提高了100~1000倍;对临床388份样品同步进行荧光PCR与液相芯片检测,结果99.87%相符。本方法为液相芯片技术在动物多病毒快速高通量检测、鉴别诊断等应用方面奠定了基础。
【作者单位】： 上海市动物疫病预防控制中心;
【分类号】：S851.3
【正文快照】： 随着养猪业规模化和集约化发展,猪繁殖障碍疫病已成为大中型猪场最重要的疫病之一。在引起猪繁殖障碍的诸多病原中,猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和日本脑炎病毒(JEV)是较为常见的RNA病毒,猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病毒(PRV)被认为是

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本文编号：1141887