氟对小鼠睾丸组织及间质细胞自噬的体内外观察

发布时间：2017-11-08 13:28

  本文关键词：氟对小鼠睾丸组织及间质细胞自噬的体内外观察

  更多相关文章： 氟 自噬 雄性生殖 睾丸 间质细胞

【摘要】：[目的]多年来对氟的研究表明,氟对雄性生殖系统的损伤是多方面的,但机理不十分明确。本研究旨在探讨氟对小鼠睾丸中自噬及相关调控基因和蛋白表达的影响,为进一步探讨氟致雄性生殖系统的损伤机理提供理论依据。[方法]体内试验选用8周龄的性成熟雄性昆明小鼠48只,随机分成4组,每组12只,分别为对照组、低氟组、中氟组和高氟组。采用饮水染氟的方法,对照组给予去离子水,染氟组分别给予含有25、50、100mg/L NaF的去离子水,饲喂60天后,断颈法处死小鼠,取其睾丸组织,分别采用qRT-PCR、Western Blot方法检测自噬及其调控相关基因及蛋白的表达量变化,并用MDC染色方法对自噬体进行观察。体外试验采用小鼠睾丸间质细胞原代培养技术,进行NaF染毒实验,攻毒剂量分别为0、0.125、0.25、0.5mM,染毒24小时后,提取间质细胞总RNA,利用qRT-PCR技术检测自噬及其调控相关基因的mRNA表达变化。[结果]1.体内试验(1)小鼠睾丸组织切片的MDC染色显示,随攻氟剂量的增加,自噬体形成逐渐增多,且氟对间质细胞自噬体形成的影响较大。(2)应用qRT-PCR技术检测小鼠睾丸中自噬及其调控相关基因的mRNA表达,结果显示,Beclinl和Atg5的mRNA表达量与对照组相比没有显著变化；LC3和p62的mRNA表达量在中氟组和高氟组显著升高(P0.05, P0.01); PI3K和AKT在中氟组和高氟组的表达量显著降低(P0.01, P0.05); AMPK的表达量高氟组显著升高(P0.05); mTOR、PDK1、TSC、ULK1和Atg13基因的表达量与对照组相比无明显差异。(3)应用Western Blot技术对小鼠睾丸中自噬相关蛋白LC3Ⅱ和p62以及自噬调控蛋白p-mTOR的表达量进行分析,结果表明：各攻氟组LC3Ⅱ的蛋白表达量与对照组相比均升高,其中低氟组和高氟组差异极显著(P0.001),高氟组差异显著(P0.05)；p62的蛋白表达量在中氟组和高氟组显著降低(P0.01);p-mTOR的表达量在中氟组和高氟组降低,且差异显著(P0.01,P0.05)。2.体外试验(1)小鼠睾丸间质细胞的MDC染色显示,随攻氟剂量的增加,间质细胞中自噬体形成逐渐增多。(2)应用qRT-PCR技术对小鼠睾丸间质细胞中自噬相关基因LC3、p62、Beclin1和Atg5的mRNA表达进行检测,结果显示,各基因的表达量均有上升趋势,其中LC3、p62和Atg5在中氟组及高氟组差异显著(P0.05,P0.01,P0.001),而Beclin1仅在高氟组有显著差异(P＜0.05)。(3)应用qRT-PCR技术对小鼠睾丸间质细胞中AKT/AMPK-mTOR通路相关基因PI3K、AKT、AMPK、mTOR、PDK1、TSC、ULK1和Atg13的mRNA表达进行检测,结果表明,PI3K、AKT、mTOR和PDKl的表达量降低,且PI3K在中氟组差异显著,AKT和PDK1在高氟组差异显著,mTOR在中氟及高氟组差异均显著(P0.05);AMPK、 TSC、Atg13的表达量升高,且AMPK、Atg13在高氟组差异显著(P0.05), TSC在各攻氟组均有显著差异(P0.05,P0.01); ULK1的表达量无明显变化。[结论]本次试验结果表明,氟暴露可以促进小鼠睾丸组织及间质细胞的自噬体形成,并且对睾丸间质细胞的影响较大,该影响可能是由AKT/AMPK-mTOR信号通路介导的。
【学位授予单位】：山西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S859.8

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 宁红梅;杨雪峰;徐之勇;葛亚明;赵恒章;田雷;;镉对生长发育期小鼠睾丸的组织学影响[J];畜牧与兽医;2012年S1期

2 张迪;朴敬爱;张永芳;张春雨;朴君;;摩托车尾气对小鼠睾丸组织形态的影响[J];动物医学进展;2009年01期

3 张子峰;朱必才;房兴堂;冯照军;汤佳立;;环境雌激素双酚A对小鼠睾丸功能的影响[J];江苏农业科学;2008年01期

4 苗翠萍;宋亚鹏;裴莉贞;宋燕;;丙烯酰胺致小鼠睾丸损伤的实验研究[J];畜牧兽医科技信息;2014年02期

5 孙相和;孔令芸;李冲;陈玲丽;宁红梅;葛亚明;;急性铅中毒对小鼠睾丸病理损伤研究[J];河南科技学院学报(自然科学版);2014年04期

6 蒋尔鹏,张远强,刘新平,张金山,赵洁;p38 MAPK在小鼠睾丸不同发育阶段的表达和定位[J];动物学报;2003年04期

7 李晟阳,罗光彬,石娇,何丽华,赵立虎;HSP70在小鼠睾丸中定位与表达研究[J];现代畜牧兽医;2005年07期

8 张国梁;张西锋;冯艳敏;张红英;李兰;;双酚A(BPA)对小鼠睾丸发育的影响[J];青岛农业大学学报(自然科学版);2012年03期

9 孙小娜;李晓彩;马爱团;钟秀会;;双酚A对雄性小鼠睾丸发育和生殖激素分泌水平的影响[J];中国兽医科学;2010年09期

10 刘玉志;李青旺;江中良;王翠玲;张欢欢;洪洁峗;;小鼠睾丸间质细胞的分离纯化与体外培养的研究[J];黑龙江畜牧兽医;2010年13期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 朱叶飞;马翔;冒韵东;王蕾;刘劝;谢满鑫;赵欣;孟艳;周作民;沙家豪;;小鼠睾丸二维电泳参照图[A];21世纪男科学——中华医学会第五次全国男科学学术会议论文集[C];2004年

2 肖长义;王雅琴;黎家华;;小鼠睾丸生精小管内残余物质形成及转归[A];中国解剖学会2012年年会论文文摘汇编[C];2012年

3 江燕;李水冰;钱伟;;不同年龄小鼠睾丸生殖细胞凋亡的研究[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展（上册）[C];2001年

4 陈敏;谢吉民;宋霞;李敏智;;五种螯合剂对镉致小鼠睾丸毒性的解毒作用比较[A];第四届全国环境与职业医学研究生学术研讨会论文集[C];2005年

5 阮海星;吴克枫;;不同剂量的环磷酰胺对小鼠睾丸染色体畸变的影响[A];中国环境诱变剂学会抗诱变剂和抗癌剂专业委员会第三次全国学术会议、中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第五届学术交流会、贵州省环境诱变剂学会成立大会暨首届学术交流会论文集[C];2004年

6 宁红梅;杨雪峰;徐之勇;葛亚明;赵恒章;田雷;;镉对生长发育期小鼠睾丸的组织学影响[A];全国动物生理生化第十二次学术交流会论文摘要汇编[C];2012年

7 张晓彦;张建海;陈书明;;三聚氰胺对小鼠睾丸p38 MAPK信号通路影响的研究[A];全国动物生理生化第十二次学术交流会论文摘要汇编[C];2012年

8 邓雯;吕琼霞;刘玉梅;;柠檬酸对小鼠睾丸组织抗氧化作用的影响[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年

9 武惠珍;王贵娟;刘贵生;雷建章;;混合除草剂对小鼠睾丸超微结构的毒性影响[A];第十三届全国电子显微学会议论文集[C];2004年

10 张波;;有机磷农药氧化乐果对小鼠睾丸细胞DNA的损伤[A];中国毒理学会第四届全国学术会议论文（摘要）集[C];2005年

中国博士学位论文全文数据库 前6条

1 朱叶飞;加热致小鼠睾丸生精障碍相关蛋白质及其功能的研究[D];南京医科大学;2006年

2 金明华;苯并（a）芘对小鼠睾丸细胞毒作用及其相关机制研究[D];吉林大学;2007年

3 王丽雅;ART操作对雄性小鼠睾丸组织基因表达和脂类代谢影响及其机理研究[D];浙江大学;2013年

4 胡涛;小鼠睾丸特异性表达基因TSEG-2的功能初步研究[D];华中科技大学;2010年

5 赵庆国;GGNBP1和GGN2在小鼠睾丸中的表达及相互作用研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年

6 胡廉;RNAi调控雄性小鼠睾丸uPA表达的研究[D];华中科技大学;2011年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 贾三三;蛋白激酶SRPK2在小鼠睾丸组织的表达特征及初步功能研究[D];山西医科大学;2016年

2 沈建;miR-10a在小鼠精子发生过程中的调控作用[D];西北农林科技大学;2016年

3 刘维佳;DPT过表达与小鼠睾丸功能障碍的关系研究[D];重庆医科大学;2016年

4 张晶;AC3缺失对小鼠睾丸组织细胞凋亡的影响及其差异表达基因分析[D];河北大学;2016年

5 谭志刚;LCN-2基因在雄性小鼠睾丸中的表达与调节[D];华南农业大学;2016年

6 刘晓美;氧化应激在三邻甲苯磷酸酯诱导小鼠睾丸间质细胞自噬中的作用[D];南昌大学;2016年

7 朱宇辰;氟对小鼠睾丸组织及间质细胞自噬的体内外观察[D];山西农业大学;2016年

8 拜潇;微囊藻毒素暴露对小鼠睾丸的生理生化影响[D];河南师范大学;2012年

9 李亮亮;吸烟对雄性小鼠睾丸非生殖细胞、睾酮及精子数量影响的相关性研究[D];安徽医科大学;2015年

10 张鹏飞;柠檬酸对小鼠睾丸组织抗氧化酶活性的影响[D];河南科技大学;2012年

，

本文编号：1157354