茶多酚和壳聚糖对猪精液常温保存效果的研究

发布时间：2017-11-09 19:21

  本文关键词：茶多酚和壳聚糖对猪精液常温保存效果的研究

  更多相关文章： 猪精液 常温保存 壳聚糖 茶多酚 细菌显微结构 精液品质

【摘要】：精液在常温保存的过程中会产生活性氧(ROS),正常情况下ROS的产生和精子的抗氧化能力处于平衡状态,只有少部分ROS用于精子正常功能如精子获能、顶体反应和受精时与卵母细胞融合等。过多的ROS将会攻击精子质膜,发生脂质过氧化反应,影响精子功能。另外,细菌在精液保存中同样会对精子产生破坏作用,影响精子正常获能,降低母畜受孕率。为了提高猪精液常温保存的效果,本研究在猪精液常温保存稀释液中添加抗氧化及抗菌物质——茶多酚与壳聚糖,检测精子活率、质膜完整率、顶体完整率、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和细菌含量,以筛选最适添加浓度并探究其抗菌机制。本研究主要获得以下结果:1.在猪精液常温保存基础稀释液中分别加入不同浓度(0.01、0.02、0.04、0.08和0.16 g/L)的茶多酚,试验结果表明,0.01、0.02、0.04和0.08 g/L的茶多酚均能提高精液保存效果。其中,当茶多酚添加浓度为0.04 g/L时,精液保存6 d后,精子活率、质膜完整率、顶体完整率分别为60.02%,46.40%,75.25%,显著高于其他组(P0.05),MDA含量为2.39 nmol/L,显著低于其他组(P0.05),T-AOC为2.31 U/m L高于其他组,但组间差异不显著(P0.05)。茶多酚对精液中细菌生长有抑制作用,精液保存4~6 d时,细菌增长速度显著低于对照组(P0.05),说明0.04 g/L的茶多酚对猪精液常温保存有益。2.在猪精液常温保存基础稀释液中分别加入不同浓度(0.05、0.1、0.2、0.4和0.8 g/L)的壳聚糖,表明随着壳聚糖浓度的增加,精液保存效果呈先增后减的趋势。保存6 d后,添加浓度为0.1 g/L与0.2 g/L的处理组精子活率均显著高于其他组(P0.05)。其中,当添加浓度为0.1 g/L时,精子活率为61.56%,高于0.2 g/L处理组,但组间差异不显著(P0.05)。另外,0.1 g/L壳聚糖能显著提高精子质膜完整率、顶体完整率和T-AOC活性,显著降低MDA含量和精液中的细菌含量(P0.05),而添加浓度为0.8 g/L时,精子各项指标显著低于其他组(P0.05)。因此,壳聚糖在猪精液常温保存稀释液中的最佳浓度为0.1 g/L。3.精液保存6 d后,0.04 g/L茶多酚和0.05 g/L壳聚糖组合效果最佳,精子活率和质膜完整率分别为67.4%和54.07%,显著高于单独添加茶多酚和壳聚糖处理组(P0.05)。与对照组相比,联合使用茶多酚-壳聚糖能显著降低精液中的细菌含量,提高精液中的SOD、CAT和GSH-PX的活性(P0.05),但与单独添加茶多酚和壳聚糖相比,GSH-PX活性提高效果不显著(P0.05)。将单独添加茶多酚和壳聚糖时的最佳浓度(0.04 g/L和0.1 g/L)组合发现,精液中的细菌含量显著降低(P0.05),但精子活率、质膜完整率和三种酶活性显著低于其他组(P0.05)。4.用茶多酚-壳聚糖复合剂处理大肠杆菌,大肠杆菌细胞膜皱缩甚至破裂,内容物外溢。同时可以观察到有部分颗粒物品进入细菌胞内,部分细菌还出现空斑。通过SDS-PAGE测定细菌总蛋白试验结果表明,处理2 h后20 kDa和50~70 kDa区域蛋白条带减弱较明显,6 h后蛋白条带稳定,与对照组相比有不同程度地减弱,其中35 kDa以下条带几乎消失,可以断定大肠杆菌蛋白表达受到严重抑制。因此,0.04 g/L茶多酚组合0.05 g/L壳聚糖能对大肠杆菌有较强破坏作用,主要通过破坏细胞膜进而破坏细胞质与细胞核,阻碍其蛋白表达。
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S828

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 钱超云;防伪一次性猪精液瓶的研制与应用[J];畜牧与兽医;2002年12期

2 王冬宝;猪精液不同方式保存活力观测[J];养殖技术顾问;2002年12期

3 孙秀奎,李朋,徐宝岩,潘兴川;徒手采集猪精液技术[J];黑龙江动物繁殖;2003年01期

4 郭志儒;我国将首次把猪精液送至太空[J];中国兽医学报;2005年05期

5 周兴旺;;新的猪精液贮存法[J];山西农业科学;1979年02期

6 葛燕军;曾根R，

本文编号：1163247