利用CRISPRi干扰研究MyoG和Myf6基因对牛骨骼肌卫星细胞分化的影响

发布时间：2017-11-11 21:06

  本文关键词：利用CRISPRi干扰研究MyoG和Myf6基因对牛骨骼肌卫星细胞分化的影响

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【摘要】：CRISPR干扰(clustered regularly interspaced short palindromic repeat interference,CRISPRi)技术因高效的基因干扰效率而成为基因功能研究的重要工具。Myo G、Myf6基因是生肌调节因子家族(myogenic regulatory factors,MRFs)的重要成员,是骨骼肌分化所必需的调控因子。该研究以牛骨骼肌卫星细胞为实验材料,探讨Myo G和Myf6基因在骨骼肌卫星细胞分化过程中的相互关系。构建Myo G、Myf6基因CRISPRi载体,分别转染牛骨骼肌卫星细胞,诱导其分化,Real-time PCR检测肌肉分化重要功能基因Myo G、Myf6、MYH2、Myo D的表达情况。结果表明,在牛骨骼肌卫星细胞分化期间,抑制Myo G基因表达将诱导Myf6基因的代偿性升高,但并不能完全弥补Myo G基因的缺少对肌肉分化产生的影响,而抑制Myf6基因表达则不会引起Myo G基因表达升高,这为肌肉分化机制的阐明提供了理论依据。
【作者单位】： 东北农业大学生命科学学院细胞生物学实验室;
【基金】：国家转基因专项“高产优质转基因肉牛新品种培育”(批准号:2014ZX08007-002)资助的课题~~
【分类号】：S823
【正文快照】： CRISPR(clustered regularly interspaced short pal-indromic repeat)技术作为继ZFN(zinc fingernucleases)和TALEN(transcription activator-like effector nucleases)后的又一新的基因编辑手段,引起了越来越多研究者的重视。该技术的原理是核酸酶Cas9蛋白受到向导RNA(singl

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本文编号：1172853