猪繁殖与呼吸综合征病毒颗粒定量检测及纯化方法的研究

发布时间：2017-11-18 04:15

  本文关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒颗粒定量检测及纯化方法的研究

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【摘要】：猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是以妊娠母猪流产、仔猪呼吸障碍和高死亡率为特征的一种高度传染性疾病,猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)是引起该病的病原。近几年该病在全世界范围内迅速蔓延,给生猪养殖业带来了巨大经济损失。对生猪进行疫苗接种可以有效控制疫病暴发,因此改进疫苗生产工艺、提高疫苗质量检测非常重要。本文对PRRS配苗前活疫苗即致弱的PRRS活病毒和灭活疫苗即PRRS灭活病毒颗粒含量的定量检测与纯化方法做了初步研究,旨在为该疫病防控与疫苗质量检测提供借鉴。本研究采用蔗糖密度梯度超速离心法对PRRS活病毒颗粒的含量做定量检测,其结果显示：同一样品三次重复实验检测相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为10%,符合药典规定的RSD≤10%。本研究采用分子筛层析法对PRRS活病毒液进行纯化,其结果显示：运用具分子筛功能的H7填料进行纯化处理后杂蛋白去除率高达80%,病毒颗粒回收率高于70%,该方法适用于实验室小体积配苗前活疫苗病毒颗粒纯化,能否用于工业大容量生产还需进一步验证。由于对PRRS灭活病毒颗粒含量直接定量检测较为困难,本研究先对PRRS灭活病毒液使用H7填料进行分子筛层析纯化,以去除大部分杂蛋白,再定量检测PRRS灭活病毒颗粒的含量,其结果显示：对同一样品进行的三次重复定量检测RSD为15.9%,大于药典规定的RSD≤10%,虽然不够理想,但该方法为PRRS灭活病毒颗粒的定量检测提供了新的思路。
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.28

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本文编号：1198501