脑膜炎型与非脑膜炎型猪链球菌诱导宿主炎性细胞因子分泌的比较

发布时间：2017-11-22 21:15

  本文关键词：脑膜炎型与非脑膜炎型猪链球菌诱导宿主炎性细胞因子分泌的比较

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【摘要】：猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)是一种由革兰氏阳性球菌,可引起人与猪的急性出血性败血症、支气管肺炎、心内膜炎、脑膜炎、关节炎等,世界上许多国家均有报道。目前链球菌引发脑膜炎的免疫学致病机制仍不清楚。一般认为,促炎性因子的上调以及白细胞的增加可能是导致脑膜炎发生的因素之一。为了解感染脑膜炎型与非脑膜炎型链球菌后宿主分泌炎性细胞因子的差异,本实验首先建立了猪链球菌小鼠感染模型,检测链球菌感染后炎性细胞因子分泌情况,比较鼠感染脑膜炎型与非脑膜炎型链球菌后炎性细胞因子的差异。结果显示,脑膜炎型链球菌感染组IL-6、IL-8和IL-17分泌水平显著高于非脑膜炎型链球菌感染组,且IL-6在不同时间点差异最显著。进一步研究发现,脑膜炎型链球菌细菌主要定植部位、病理变化部位均为脑部,同时在脑组织中MPO和IL-6水平均显著高于非脑膜炎组,且与链球菌定植量呈现负相关性,表明IL-6在一定程度上可以反映脑膜炎型链球菌感染进程。在此基础上,将致病性猪链球菌回归易感动物仔猪,分析脑膜炎型与非脑膜炎型免疫学差异。以脑膜炎型链球菌菌株JZLQ022和非脑膜炎型链球菌菌株JZLQ001接种巴马小型猪,观察感染后小型猪的临床症状、病理变化及检测相关免疫指标,结果表明JZLQ022感染组在感染后出现典型的脑膜炎神经症状和病理学变化。血液常规的检测结果发现JZLQ022感染组在感染后前期外周血白细胞、中性粒细胞显著高于JZLQ001感染组,而感染后期白细胞、中性粒细胞显著下降。同时检测脑组织中内源性Ig G含量发现,脑膜炎型感染组在脑组织内Ig G显著高于非脑膜炎型感染组,表明脑膜炎型感染组血脑屏障(BBB)开放程度增加,BBB被破坏。通过ELISA进一步证实外周血和脑脊液中IL-6、IL-8和IL-17的含量在脑膜炎型感染组显著高表达于非脑膜炎感染组,与鼠感染模型结果相一致。因此,进一步证实IL-6、IL-8和IL-17可作为脑膜炎链球菌感染早期的诊断标志。为了证明细胞因子IL-6的大量分泌是否与链球菌某些成分有关,本研究采用分子生物学技术在大肠杆菌BL21 Codon Plus(DE3)中成功诱导表达链球菌溶血素(Sly),用Sly刺激脑膜炎型链球菌与非脑膜炎型链球菌感染的淋巴细胞,发现脑膜炎型链球菌感染组分泌IL-6水平显著高于非脑膜炎型链球菌感染组。本研究以链球菌实验感染鼠、猪模型,证实IL-6、IL-8和IL-17在脑膜炎型链球菌感染显著升高,而且猪链球菌溶血素能够特异性刺激脑膜炎型链球菌感染的淋巴细胞高水平分泌IL-6,因此溶血素可能是通过诱导高水平炎性因子参与增强血脑屏障通透性的重要毒力因子之一,为深入了解猪链球菌型脑膜炎的发病机制补充必要的免疫学数据。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.28

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本文编号：1216081