荧光定量RT-PCR检测PRRSV方法的建立及初步应用

发布时间：2017-11-24 17:27

  本文关键词：荧光定量RT-PCR检测PRRSV方法的建立及初步应用

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【摘要】：以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5保守区域为靶基因,基于SYBR Green构建了以RNA为模板、反转录和PCR扩增一步完成的荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法。该方法对质粒和细胞培养物中病毒的检测限分别为1×100copies/μL和1×10-2TCID50/m L;组内和组间差异系数(CV)均小于5%。利用本方法检测126份临床组织样品,PRRSV阳性率为42.06%,与传统RT-PCR检测结果具有较好的一致性(Kappa=0.918),且敏感性显著高于传统RT-PCR。本研究建立的qRT-PCR方法为猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断提供了技术手段。
【作者单位】： 浙江农林大学动物科技学院;浙江农林大学动物健康检测中心;
【基金】：中国博士后科学基金(2012M521187) 浙江省公益性研究农业项目(2014C32061) 浙江省新苗人才项目(2014R412002) 浙江农林大学创新训练项目(201301002);浙江农林大学科研人才启动项目(2013FR076)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive andrespiratory syndrome,PRRS)是全世界范围内的高度接触性病毒性传染病,严重影响养猪行业健康发展,被OIE列为必须通报的动物疫病。该病在1987年首次发现于美国和欧洲,随后日本等亚洲国家亦陆续报道该病[1-4]。我国PRRS首发被报道发

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1 郭川;吴国平;郑忠辉;苏文金;曹敏杰;;猪繁殖和呼吸综合征病毒福建毒株ORF5的序列分析及原核表达[J];厦门大学学报(自然科学版);2006年01期

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本文编号：1223048