布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应分子BPE123和BPE275基因的原核表达与鉴定

发布时间：2017-11-27 14:22

  本文关键词：布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应分子BPE123和BPE275基因的原核表达与鉴定

  更多相关文章： 布鲁氏菌 Ⅳ型分泌系统 效应蛋白

【摘要】：【目的】克隆布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应分子BPE123和BPE275的基因并进行诱导表达。【方法】从牛种布鲁氏菌2308株基因组中PCR扩增BPE123和BPE275基因片段,亚克隆到pGEM-T Easy载体中并测序。将BPE123和BPE275基因克隆至融合表达载体pET-28a,构建表达重组质粒pET-28a-BPE123和pET-28aBPE275,在大肠杆菌中进行诱导表达,Western blot分析重组蛋白His-BPE123和His-BPE275的免疫学特性。【结果】PCR扩增获得了462bp的BPE123基因片段和762bp的BPE275基因片段,成功构建了pET-28a-BPE123、pET-28a-BPE275原核表达载体,并在大肠杆菌中成功表达了BPE123和BPE275蛋白,经SDS-PAGE检测,重组融合蛋白BPE123、BPE275的分子质量分别约为22和31ku,布鲁氏菌免疫动物血清能特异性识别表达的蛋白。【结论】克隆了分泌蛋白BPE123、BPE275基因片段,并成功表达了布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应分子BPE123和BPE275。
【作者单位】： 石河子大学动物科技学院动物疾病防控兵团重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金项目(31360610) 新疆生产建设兵团国际合作项目(2013BC005) 石河子大学杰出青年项目(2012ZRKXJQ02)
【分类号】：S852.61
【正文快照】： them.布鲁氏菌病(Brucellosis)简称为布病,其致病菌为布鲁氏杆菌(Brucella)。布鲁氏杆菌是一种革兰氏阴性、兼性胞内寄生菌,它可以感染人和动物,人主要表现为持续性感染并常伴有关节炎和心内膜炎等症状;动物感染后,公畜表现为睾丸肿胀,母畜表现为不孕或流产。作为胞内寄生菌,，

本文编号：1232148