牦牛BCMO1和BCO2基因的克隆与定量表达

发布时间：2017-11-30 17:50

  本文关键词：牦牛BCMO1和BCO2基因的克隆与定量表达

  更多相关文章： 牦牛 β-胡萝卜素 基因克隆 定量表达 代谢机制

【摘要】：在适应高原严寒环境方面,牦牛脂肪在能量储存、保护组织、保持体温及维持机体脂溶性维生素平衡等方面具有重要作用。在青绿牧草极缺的季节,牦牛仍然能够维持体内维生素A的平衡,这与牦牛脂肪富集大量类胡萝卜素直接相关。已有研究表明牦牛的黄色脂肪是由脂肪组织中的β-胡萝卜素富集所致,那么,牦牛的黄脂以及特殊的代谢途径也很有可能与β-胡萝卜素的富集能力有关。本文选取了参与β-胡萝卜素代谢的相关酶基因BCMO1基因和BCO2基因为研究对象,利用RT-PCR和RACE技术,克隆得到牦牛的BCMO1基因和BCO2基因全长cDNA序列,并对基因结构和蛋白质结构进行分析;采用实时荧光定量法检测牦牛营养丰盛期和营养匮乏期牦牛BCMO1基因和BCO2基因mRNA的表达差异。结果显示:BCMO1基因的序列全长为1916bp,包括开放阅读框(ORF)1644bp,可编码576个氨基酸。BCO2基因的全长序列为2043bp,开放阅读框(ORF)长度1662bp,编码553个氨基酸。基因结构分析发现,BCMO1基因5'非编码区包含的启动子元件TATA盒保证了基因转录的正确定位;牦牛BCO2基因在其核苷酸序列发生了无义突变,使其编码的氨基酸残基发生了改变,对于这种改变是否导致了牦牛黄脂的形成还有待进一步的验证。蛋白质结构的分析发现,两种蛋白都具有RPE65超级家族的保守结构,BCMO1是胞浆蛋白,而BCO2是线粒体蛋白。不同的营养时期牦牛BCMO1和BCO2基因mRNA在肌肉、肝脏、肺脏、肾脏、瘤胃、十二指肠、空肠和回肠8个被检组织中均有表达,同一时期各组织之间的相对表达量差异显著(P0.05)。其中,BCMO1基因mRNA在不同时期同一组织中的相对表达量呈稳定趋势,均在牦牛十二指肠中最高(P0.05),在肺脏中最低(P0.05)。BCO2基因mRNA在营养匮乏期的相对表达量在牦牛十二指肠中最高(P0.05),在瘤胃中最低(P0.05);在营养丰盛期BCO2基因mRNA的表达量在牦牛肌肉组织中最高(P0.05),在肺脏中最低(P0.05)。牦牛BCMO1基因和BCO2基因的组织表达特征与类胡萝卜素的摄入水平呈一定的相关性,可能在牦牛的维生素代谢调节和季节性营养适应机制方面发挥着重要作用。
【学位授予单位】：青海大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S823.85

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本文编号：1239952