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水貂主要细菌性肺炎的流行病学调查

发布时间:2017-12-12 06:05

  本文关键词:水貂主要细菌性肺炎的流行病学调查


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【摘要】:近年来,随着经济的发展,山东省的毛皮动物养殖业发展非常迅速。目前山东省已成为我国毛皮动物养殖第一大省,现在毛皮动物饲养量约占全国的二分之一左右。但是随着我省毛皮动物养殖业集约化程度的逐渐提高,毛皮动物的发病率也持续上升已成为制约我国毛皮动物产业发展的重要因素,给毛皮动物养殖业造成了很大的经济损失。水貂出血性肺炎是严重妨碍水貂养殖业的重要疫病之一,疫情日趋严重。研究表明,犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)、流行性感冒(Influenza)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa,P.aeruginosa)、水貂克雷伯氏菌(1Klebsiella peneumoniae1)、葡萄球菌(Staphylococcus)、大肠杆菌(Escherichia Coli)是引起水貂出血性肺炎的常见病原。本研究采用常规细菌分离鉴定技术,对109份患出血性肺炎的水貂的肺组织进行了细菌的分离鉴定。其中未能纯培养的有10株,可纯培养的有99株,纯培养的99株细菌在普通营养琼脂培养基上表现各种不同的生长形态。提取细菌基因组DNA后,懫用PCR方法利用细菌16SrRNA序列通用的引物16S-1492R和16S-27F进行扩增后测序获得菌株16SrRNA基因序列。用NCBI-BLAST软件,将测序序列在Gen Bank数据库中进行同源性检索分析,初步确定细菌的种属,再根据细菌在生化反应中表现的特性确定细菌种属。经过实验鉴定的结果表明,99株细菌中,其中31株克雷伯氏菌,该菌的检出率为28.4%(31/109);13株绿脓杆菌,该菌的检出率为11.9%(13/109);34株大肠杆菌,该菌的检出率为31.2%(34/109);8株葡萄球菌,该菌的检出率为7.3%(8/109);2株变形杆菌,3株粪肠球菌,2株奇异变形杆菌,2株芽孢杆菌,1株枸橼酸杆菌,1株弗氏柠檬酸杆菌,1株蜡样芽孢杆菌,1株橙黄微小杆菌。16SrRNA序列同源性分析结果表明,13株绿脓杆菌分离菌间的核苷酸序列同源性为84.2%-100%,其中,除SD P.a-9与其他12株间的同源性较低,在84.2%-87.3%之间,其他12株间的同源性相对较高。遗传演化分析结果显示SD P.A-9与其他12株同源性较低,处于第一分支。SD P.a-4和SD P.a-12亲缘关系较近,SD P.a-1和参考株DM5、s7ps5与同一小分支上亲缘关系较近。分离的31株克雷伯氏菌分离菌间的核苷酸序列同源性为75.2%-100%,SD Kp 8与其他30株同源性较低,为75.2%-76.6%。其余30株同源性均较高。遗传演化分析结果显示SD Kp 8与其余30株亲缘关系较远,处于第一分支。分离的34株大肠杆菌分离菌间的核苷酸序列同源性为96.3%-100%,同源性很高。遗传演化分析结果显示在进化关系上SD Eco-4与其他33株亲缘关系较远,处于第一分支,其他33株处于第二分支,亲缘关系均较近。分离的8株葡萄球菌分离菌间的核苷酸序列同源性为97.3%-100%,SD Sau-5与SD Sau-6间的同源性较高,处于一个小分支。但sau5、sau6与其他六株的同源性较低。SD sau1、SD sau2、SD sau3、SD sau4、SD sau7、sau8六株之间的同源性较高,均在98%以上。遗传演化分析结果显示在进化关系上SD sau5与SD sau6亲缘关系较近,处于第一分支。SD sau2和SD sau3亲缘关系较近,和SD sau4亲缘关系较近,SD sau7与SD sau8亲缘关系较近。SD sau1、SD sau2、SD sau3、SD sau4、SD sau7、sau8六株处于进化树的第二分支。通过对检测菌株克雷伯氏菌进行药敏试验,发现该细菌对氟苯尼考,阿米卡星,头孢他啶,氧氟沙星等药敏感;通过对检测菌株绿脓杆菌进行药敏试验,发现该菌对头孢哌酮,链霉素,阿米卡星,头孢他啶,氧氟沙星等药敏感;通过对检测菌株大肠杆菌进行药敏试验,发现该细菌对头孢曲松,头孢噻肟,头孢他啶,阿米卡星,氟苯尼考等药敏感;通过对检测菌株葡萄球菌进行药敏试验,发现该细菌对阿莫西林,头孢噻肟,头孢哌酮,氨苄西林,氟苯尼考等药敏感。对病料进行解剖,发现主要以肺脏出血为主。对送检病料进行分子生物学检测,对水貂肺炎主要病原菌分析,表明克雷伯氏菌、绿脓杆菌、大肠杆菌和葡萄球菌的感染率比较高,大多数对阿米卡星、头孢类的药物敏感,可根据病情进行对症治疗。本试验初步了解山东省各地区水貂出血性肺炎的病原菌的感染率,了解水貂出血性肺炎主要细菌病的病原及耐药性,为进一步防治水貂出血性肺炎提供依据。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S858.92

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本文编号:1281408

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