山羊IFN-γ免疫血清制备及抗体ELISA检测方法的建立

发布时间：2017-12-14 18:21

  本文关键词：山羊IFN-γ免疫血清制备及抗体ELISA检测方法的建立

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【摘要】：为制备山羊干扰素-γ(IFN-γ)免疫血清并建立山羊IFN-γ抗体ELISA检测方法 ,以原核表达的山羊γIFN重组蛋白(rIFN-γ)为材料,免疫小鼠制备免疫血清;通过对测定不同的抗原包被浓度及包被时间,酶标抗体稀释度,免疫血清的孵育时间等条件的优化建立检测抗体效价的ELISA检测方法,并采用建立的方法测定免疫血清的抗体效价。结果显示,rIFN-γ抗原包被浓度为10μg/mL,4℃包被12h;酶标抗体稀释度为1∶5 000;免疫血清孵育时间为60min,可以得到最佳ELISA的检测结果。重复试验显示该方法变异系数(CV)在1.5%~5%之间。采用建立的方法测得免疫小鼠免疫血清效价为107。该ELISA检测方法灵敏高,稳定性好,为山羊IFN-γ抗体检测提供了技术支持。
【作者单位】： 西北农林科技大学动物医学院;
【基金】：陕西省科技统筹创新工程计划项目(2015KTTSNY04-04)
【分类号】：S827
【正文快照】： γ干扰素(IFN-γ)是一种重要的细胞因子,主要参与细胞免疫[1]。病毒、细胞内寄生菌等病原体入侵机体[2],或肿瘤细胞的产生[3],都会刺激机体产生IFN-γ,诱导巨噬细胞、T细胞、B细胞等细胞MHCⅡ类分子的表达,提高抗原递呈能力;IFN-γ也能活化巨噬细胞、NK细胞等,提高其对病原体

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本文编号：1288903