应用特异性探针药物分析双峰驼CYP2D6酶体外活性

发布时间：2017-12-17 07:00

  本文关键词：应用特异性探针药物分析双峰驼CYP2D6酶体外活性

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【摘要】：动物CYP酶是代谢药物、外源性化学物质和内源性化合物的超家族酶系,其中CYP2D6亚酶虽然只占动物肝CYP酶系的2%,却承担着约20%左右的药物代谢。作者旨在较为系统地研究双峰驼CYP2D6酶的体外活性及其对特异性抑制剂的敏感性。采用差速离心法制备双峰驼肝微粒体,借助BCA法和CO还原差示光谱法测定肝微粒体蛋白浓度和CYP总酶含量。并在优化肝微粒体孵育体系及建立CYP2D6酶的特异性底物氢溴酸右美沙芬及其活性代谢产物去甲右美沙芬高效液相色谱法的基础上,研究双峰驼CYP2D6酶的动力学特征、底物代谢率及特异性抑制剂奎尼丁对该酶的抑制作用。结果表明,双峰驼肝微粒体蛋白浓度、CYP总酶含量均能满足试验要求。建立的测定酶底物和产物的HPLC法灵敏度高、稳定性好,且各成分分离完全、峰形良好、无干扰。双峰驼CYP2D6酶的Vmax值为(0.141 6±0.052 7)nmol·(min·mg)-1,Km值为(12.986 0±0.357 2)μmol·L-1。奎尼丁对双峰驼CYP2D6酶的半数抑制浓度IC50为(2.779 0±0.063 9)μmol·L-1。因此,该试验不仅为深入研究双峰驼CYP2D6酶体外活性成功建立并优化了反应体系,而且得出了双峰驼CYP2D6酶动力学参数和特异性抑制剂的IC50值,填补了该领域的空白。
【作者单位】： 内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室;内蒙古骆驼研究院;
【基金】：国家自然科学基金项目(31260623)
【分类号】：S824
【正文快照】： 双峰驼是戈壁、荒漠半荒漠草原的特有畜种,不仅曾经是我国北方游牧民族的主要交通工具,而且也是中原与西域友好交往的重要桥梁。对东西方文化交流、经济贸易的发展功不可没。然而,随着现代交通的快速发展,双峰驼的这一重要作用逐渐被取代,失去了昔日的重要地位,养殖数量急剧下，

本文编号：1299138