黄芩与鼠李糖乳杆菌发酵产物对仔猪大肠杆菌腹泻治疗效果研究
发布时间：2017-12-20 08:34
本文关键词：黄芩与鼠李糖乳杆菌发酵产物对仔猪大肠杆菌腹泻治疗效果研究 出处：《吉林农业大学》2016年硕士论文 论文类型：学位论文
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【摘要】：仔猪大肠杆菌病主要是由肠毒素型大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)引起的一种频发、急性、死亡率较高的肠道传染病,对初生仔猪的生长发育危害极大。随着猪养殖业的不断发展,该病的发病率和死亡率也不断上升,经过不断研究,中药微生物发酵成为仔猪大肠杆菌病防治的新路径,此方法把适宜营养物质作为发酵培养基,通过微生物生长代谢活动增加中药活性成分的转化,使其原有性能发生改变、副作用降低、药效扩大。为探究中药微生物发酵产物对ETEC腹泻的防治效果,本研究首先对鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)ATCC53103的培养基及发酵所需温度、时间、接种量等条件进行优化;其次选取20味中药,通过最小抑菌浓度和体外抑菌试验的测定,发现黄芩对ETEC的抑菌作用最明显;最后将黄芩与鼠李糖乳杆菌ATCC53103进行发酵处理,对其发酵产物采用体外抑菌试验、多糖含量测定和动物试验进行研究,首先建立由ETEC引起仔猪腹泻的模型,进而将30日龄的生长状况相同、体重相近的同一批仔猪平均分为A、B、C、D、E五组,除E组外每头仔猪都灌喂5mL的浓度为3.65×1010CFU/mL的K88大肠杆菌菌液,待全部腹泻后,A、B、C、D、组分别灌喂生理盐水、发酵液、恩诺沙星、黄芩液,待喂服药物后每两天进行一次体重、采食量等指标的测量,第7、14天清晨空腹采血检测免疫指标,14天后将仔猪全部宰杀取肠断进行病理切片检测。具体试验结果如下:(1)通过碳、氮源的改良实验,确定Lactobacillus rhamnosus ATCC53103生长的培养基为:葡萄糖1%,蛋白胨3%,酵母粉2%,CH3COONa 0.5%,C6H17N3O7 0.2%,K2HPO4·3H2O 0.2%,MgSO4·7H2O 0.02%,MnSO4·H2 O 0.05%,吐温-80 0.1%,可确定在改良培养液中LGG ATCC53103的菌数可达到6.8×109cfu/mL;最适发酵条件为:150mL培养液装入250mL量程的锥形瓶内,pH调制为6,菌接种4%,温度、转速、时间分别设置为37℃、80r/min、24h。中药筛选实验中,通过对20味中药最小抑菌浓度的测定,得出金银花、黄芩、黄柏、黄连四种抑菌浓度相同且最小,对这四味中药继续进行抑菌试验的测定,金银花抑菌圈:1.803±0.064cm,黄柏抑菌圈:1.640±0.624cm,黄芩抑菌圈:2.057±0.070cm,黄连抑菌圈:1.780±0.036cm,从抑菌结果得出黄芩的抑菌作用最优。(2)黄芩协同Lactobacillus rhamnosus ATCC53103发酵条件优化及治疗ETEC腹泻效果研究,最优发酵条件设置为:菌接种4%,中药含量13%,pH调制为6,温度、转速、时间分别为37°C、80r/min和30h;在动物实验中,治疗前期,日采食量、平均增重在各治疗组之间差异不显著,各组血清中IgA含量差异较大,治疗组中IgA含量均高于空白组与对照组,发酵产物组IgA含量最高且差异及其显著(P㩳0.01),治疗后期时各组生产性能较前期均有明显提高,治疗组和对照组之间差距明显(P㩳0.05),各治疗组仔猪的血清中IgA含量降低,且差异不显著;发酵产物组腹泻率、粪便计分、肠病变程度均低于其他治疗组;血清抑菌试验结果:空白组:0.663±0.070cm,恩诺沙星组:1.603±0.064cm,发酵液组:1.850±0.060cm,黄芩组:1.580±0.036m,发酵液组抑菌环均大于空白组和其他对照组且差异显著(P㩳0.05),由此可见,黄芩与Lactobacillus rhamnosus ATCC53103协同发酵产物治疗仔猪ETEC性大肠杆菌病效果最佳。
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.28
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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本文编号：1311448
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