猪传染性胸膜肺炎放线杆菌LAMP方法的建立

发布时间：2017-12-31 04:39

  本文关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌LAMP方法的建立　出处：《中国兽医学报》2016年02期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：为建立快速检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的鉴别方法,本研究根据APP ApxIVA基因的保守区设计6条环介导等温扩增(LAMP)引物,利用Loopamp Realtime Turbidimeter LA-320c实时浊度仪对反应体系和条件进行优化,建立了APP的LAMP方法。结果显示:该方法在64℃下反应15min DNA即可出现扩增,扩增后2~3min内即可判定结果,最低检测限为0.307ng/L,具有良好的重复性及稳定性,与其他病原菌无交叉反应,同时,试验结果可实现肉眼可视化观察。采用建立的LAMP方法与SN/T 1447-2011标准公布的方法同时对36份临床疑似APP样品进行检测分析,结果显示:APP阳性10份,阴性26份,两种方法的符合率为100%。本研究建立的方法为防止猪传染性胸膜肺炎的传播提供了有效的检测手段。
[Abstract]:In order to establish a method for rapid detection of Actinobacillus pleuropneumoniae ( APP ) , 6 loop - mediated isothermal amplification ( LAMP ) primers were designed according to the conserved region of APP - Apxva gene , and the LAMP method of APP was established .

【作者单位】： 西南大学动物科技学院;重庆出入境检验检疫局/重庆市进出口食品安全工程中心;重庆大学生物工程学院;
【基金】：质检公益性资助项目(201310093) 国家质检总局科技资助项目(2014IK247;2013IK049)
【分类号】：S858.28
【正文快照】： *Corresponding author,E-mail:nie1626@163.com;liuli@126.com猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae,APP)作为猪传染性胸膜肺炎(porcine contagious pleuropneumonia,PCP)的病原菌,可引起严重的传染性呼吸道疾病,该病具有高发病率和致死率,广泛分布于中

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本文编号：1358187