α-菠菜甾醇对小鼠小肠P糖蛋白和寡肽转运体PepT1药物转运体的影响研究

发布时间：2018-01-14 03:19

  本文关键词：α-菠菜甾醇对小鼠小肠P糖蛋白和寡肽转运体PepT1药物转运体的影响研究　出处：《四川农业大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的：本实验在中药引经的理论指导下,结合本实验室前期对桔梗引经作用的研究方法,首先从桔梗各有效成分中筛选出化学结构清晰的αα-菠菜甾醇(α-spinasterol)作为研究物质,然后选用酒石酸泰乐菌素(Tylosin tartrate)为底药,利用免疫组化,荧光定量PCR (Realtime fluorescence quantitative PCR, RTFQ PCR)和免疫蛋白印迹(Western blotting, WB)等研究方法,通过研究α-菠菜甾醇对小鼠小肠段外排型药物转运体P糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)和摄取型药物转运体寡肽转运体1(oligopeptide transporter, PepTl)表达的影响,初步探讨在吸收环节上使桔梗发挥“载药上行”作用的机理,为进一步研究引经作用机制等实验提供基础,同时为验证引经理论的科学性。方法：144只健康昆明小鼠,随机分为4个组,每组36只,雌雄各半。I组：单剂量一次灌服α-菠菜甾醇[12.5mg/(kg·b·w)];Ⅱ组：单剂量一次同时灌服α-菠菜甾醇[12.5mg/(kg·b·w)]与酒石酸泰乐菌素[600mg/(kg·b·w)];Ⅲ组：单剂量一次灌服酒石酸泰乐菌素[600mg/(kg·b·w)];Ⅳ组：单剂量一次灌服生理盐水。每组按0.2mL·10g-1BW的剂量共灌胃5天,分别在1,3,5天后处死一批采样。采用免疫组化,荧光定量PCR和免疫蛋白印迹的方法测定1,3,5天的小鼠肠道上P-gp和PepTl的表达的变化。结果：从三个方法的结果来看：I组(a-菠菜甾醇组)和II组(混合组)相对于Ⅳ组(对照组)外排型药物转运体P-gp表达减少或强度减弱：而摄取型药物转运体PepT1表达增多或强度增强;而III组(酒石酸泰乐菌素组)的外排型药物转运体P-gp表达增多或强度增强：摄取型药物转运体PepT1表达减少或强度减弱,且都随着用药时间的延长差异性越来越显著(P0.01)。其中免疫组化结果表明,P-gp在十二指肠的变化差异较空肠和回肠更加明显,而PepT1在空肠的变化比十二指肠和回肠更为显著；荧光定量PCR和免疫印迹结果显示,P-gp在各肠段的表达是从近端到远端逐渐递增,而PepTl在各肠段的表达在十二指肠最多,在空肠和回肠依次递减。结论：①α-菠菜甾醇具有抑制药物转运体P-gp表达和促进药物转运体PepT1表达的作用。②酒石酸泰乐菌素具有促进P-gp表达和抑制PepTl表达的作用。③桔梗“引经”在吸收环节上的作用机理之一是作用于肠道上的药物转运体。④酒石酸泰乐菌素和α-菠菜甾醇产生的药物间相互作用(Drug-drug interaction, DDI)的机制之一是通过作用于P-gp和PepT1两个靶点。
[Abstract]:Objective: this experiment through theory in traditional Chinese medicine, combined with the previous research methods of Platycodon grandiflorum cited by the role, first screened clear chemical structure of alpha spinasterol from the active ingredient of Platycodon grandiflorum (alpha -spinasterol) as the research material, and then choose a wine stone acid tylosin (Tylosin tartrate) for the end of medicine, by immunohistochemistry, fluorescence quantitative PCR (Realtime fluorescence quantitative PCR, RTFQ PCR) and Western blot (Western blotting, WB) and other research methods, through the study of alpha spinasterol on mice intestinal drug efflux transporter P glycoprotein (P-glycoprotein, P-gp) and drug uptake transporter peptide transporter 1 (oligopeptide transporter, PepTl) on the expression of the preliminary discussion on the absorption of links to play "loading up mechanism of Platycodon", for further study cited by the mechanism of real 楠屾彁渚涘熀纭，

本文编号：1421793