绵羊骨骼肌特异表达miRNA前体多态及其表达分析

发布时间：2018-01-19 18:58

  本文关键词： 绵羊 骨骼肌 特异 表达 miRNA 前体 多态 及其 分析　出处：《石河子大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：提高绵羊的产肉性能在绵羊养殖业中具有重要的生产意义。据研究表明,mi RNA在骨骼肌发育过程中起到重要的调控作用。而mi R-1,mi R-133和mi R-206三种mi RNA在骨骼肌和心肌中特异表达,与肌肉发育息息相关。鉴于此,本论文以mi R-1,mi R-133和mi R-206及其前体为研究对象,从以下几个方面探究其在绵羊骨骼肌发育中的表达规律及生物学作用:1.采集发育时间为45天、65天、85天、105天和125天的绵羊胚胎,提取后肢骨骼肌样品并提取RNA,利用荧光定量PCR技术研究mi R-1,mi R-133和mi R-206在绵羊胚胎阶段的不同时期以及成年后的表达规律。2.采用PCR-SSCP及测序检测mi R-1,mi R-133和mi R-206前体序列在不同产肉性能的四个绵羊品种(特克赛尔羊、阿勒泰羊、中国美利奴羊和湖羊)中的多态性,发现m i R-133前体g.54047535位点存在一个AG突变,该位点存在AA、AG、GG三种基因型。并对该突变位点在不同品种绵羊群体中的基因频率进行生物统计学分析,证明该位点G等位基因频率在特克赛尔羊群体中远高于A等位基因,其差异显著(p0.5)。二级结构预测分析表明该突变可以提高mi R-133前体基因二级结构的稳定性。3.将包含该突变位点的mi R-133前体基因序列构建表达载体,转入Hela细胞,在细胞水平验证其前体序列的改变对mi RNA成熟加工的影响。实验证明包含GG基因型的基因片段能够显著提高细胞内mi R-133的表达量。本论文的研究成果可在分子水平初步阐明mi R-1,mi R-133和mi R-206的表达量及其前体序列的改变与绵羊骨骼肌生长发育的相关性,为绵羊骨骼肌生长发育的调控及优良肉羊品种的培育提供理论基础及手段,对提高绵羊的产肉性能和肉羊育种产生积极地推动作用。
[Abstract]:The expression of mi R - 1 , mi R - 133 and mi R - 206 in sheep ' s skeletal muscle was studied by means of PCR - SSCP and sequencing .

【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S826

【参考文献】

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本文编号：1445155