不同钙水平对氟中毒大鼠骨质损伤及内质网应激的影响

发布时间：2018-01-19 20:57

  本文关键词： 氟中毒 钙 内质网应激 骨质损伤 大鼠　出处：《山西农业大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：[目的]本研究旨在探讨外源性钙对氟致骨质损伤以及成骨细胞凋亡过程中内质网应激引发相关蛋白和基因表达水平的影响,揭示外源性钙对氟中毒缓解作用的机制,为防止氟中毒盲目补钙提供理论依据。[方法]160只SD雄性大鼠随机分为五组。每组进行如下处理：空白对照组(C)饲喂普通饲料饮用蒸馏水,染氟组(F)饲喂普通饲料饮用氟化钠水(150mg/L),染氟补低钙组(F+Ca Ⅰ)饲喂含0.5%CAC03饲料饮用氟化钠水(150mg/L),染氟补中钙组(F+CaⅡ)饲喂含1%CaC03饲料饮用氟化钠水(150mg/L),染氟补高钙组(F+CaⅢ)饲喂含2%CaCO3饲料饮用氟化钠水(150mg/L)。试验周期为30天、60天、90天、120天,不同时间段处理后,采集血清、股骨等组织,进行相关的骨代谢激素、骨氟含量、生物力学以及内质网应激相关基因和蛋白测定,包括使用氟离子选择电极测量骨氟含量,放射免疫法测量血清中生殖相关激素的含量,透射电子显微镜观察组织形态结构的变化。real-time PCR 和 Westernblotting技术检测成骨细胞凋亡过程中内质网应激相关基因mRNA和蛋白的表达水平。[结果]1.各组氟含量随着实验时间的增加氟含量也相应的增加。2.血清中骨代谢相关激素测定结果：高氟引起甲状旁腺激素、血清骨钙素水平显著升高,引起血清降钙素水平降低,而补充1%CaCO3可以使甲状旁腺激素和血清骨钙素水平降低趋近于对照组水平,使血清降钙素水平显著升高和对照组水平相近。3.通过骨生物力学的材料性能指标和结构力学指标可以看出高氟对骨质的损伤明显,补中剂量的钙可以对骨质损伤有很好的缓解作用,而补低剂量和高剂量的钙均对骨质损伤无效果。4.透射电镜下观察120日龄骨细胞超微结构变化,空白对照组可见细胞器完整结构清晰,线粒体丰富,粗面内质网发达；染氟组可见细胞内大量细胞器丢失溶解,线粒体基质变淡,线粒体消失或空泡变性,粗面内质网颗粒脱落,解聚；补1%CaC03使成骨细胞内细胞器较为完整,线粒体丰富,粗面内质网轻微扩张,少量颗粒脱落。对氟中毒引起的损伤有显著的减轻。5.在mRNA水平测定和蛋白表达观察到氟对成骨细胞凋亡过程中与内质网应激相关的capase-12 和 calapin等基因水平和蛋白表达显著升高,而补1%CaCO3对氟中毒致内质网应激相关基因和蛋白水平有显著降低。[结论]研究结果显示,在宏观水平上通过骨生物力学和透射电镜观察可以看出高氟引起骨质损伤,微观水平上通过对mRNA水平和蛋白表达的测定可以知道高氟使内质网应激相关的capase-12 和 calapin等基因水平和蛋白表达升高;补充1%CaC03对氟中毒大鼠的骨质损伤和内质网应激有缓解作用,减轻氟对大鼠骨质的损伤。
[Abstract]:[Objective] to investigate the effects of exogenous calcium on the expression of related proteins and genes induced by endoplasmic reticulum stress during fluorine-induced bone injury and osteoblast apoptosis. To reveal the mechanism of exogenous calcium in relieving fluorosis and to provide theoretical basis for preventing blind calcium supplement from fluorosis. [Methods: 160 Sprague-Dawley male rats were randomly divided into five groups. Each group was treated as follows: the blank control group (C) was fed with common feed for drinking distilled water. Fluorine group (F) was fed with sodium fluoride water (150 mg / L) and low calcium group (F Ca 鈪，

本文编号：1445511