猪精液稀释剂中抗生素的敏感性研究
本文关键词: 猪 精液 微生物 抗生素 敏感性 出处:《西北农林科技大学》2015年硕士论文 论文类型:学位论文
【摘要】:精液保存技术在猪人工授精实施过程中起着非常关键的作用,只有不断提高猪精液常温保存的效果,猪人工授精技术才能发挥更大作用。随着我国猪人工授精技术的应用与推广,常温保存稀释剂的需求不断增加,然而我国拥有自主知识产权的猪精液常温保存稀释剂存在稀释精液后保存时间短、精子活率低等问题。这与稀释剂中抗生素使用不合理,稀释精液中微生物大量滋生抑制精子正常代谢活动有关。因此,通过进一步研究为猪精液常温保存稀释剂中抗生素的应用提供理论依据,并依此开发具有我国自主知识产权,且成本低、品质优的抑菌稀释剂,对我国生猪养殖产业的发展具有重要意义。为了筛选出一种对于公猪精液常见菌种抑制效果良好且稳定的抗生素使用方案,本研究通过对公猪精液的培养分离得到纯化菌种,经形态分析、培养鉴定和生理生化反应鉴定确定其种类,以平板菌落计数法和最大或然数法统计各菌种所占比例。据此结果,并综合考虑抗生素联合使用杜绝配伍禁忌的原则和菌种对抗生素的药敏反应强度,制定了抗生素联合使用方案,并将其加入稀释精液中验证对精液保存效果的影响。本研究主要获得以下结果:1.从公猪精液中共分离出微生物菌种9种,分别是细菌7种、丝状真菌2种。其中细菌主要为好氧或兼性厌氧发酵型革兰氏阴性杆菌埃希菌属(Escherichia Castellani and Chalmers,1919)1种、变形杆菌属(Proteus Hauser,1885)2种、肠杆菌属(Enterobacter Hormaeche and Edwards,1960)1种、沙门氏菌属(Salmonella Lignieres,1900)1种、志贺氏菌属(Shigella Castellani and Chalmers,1919)1种与革兰氏阳性好氧和兼性厌氧球菌葡萄球菌属(Staphylococcus Rosenbach)1种。丝状真菌主要为丛梗孢科(Moniliaceae)曲霉属(Aspergillus Micheli)1种、青霉属(Penicillium Link)1种。公猪精液中总菌种数在7.0~7.2×103个/mL,其中大肠埃希氏菌属占15.27%、普通变形杆菌(Proteus vulgaris)占9.60%、奇异变形杆菌(Proteus marabilis)占14.83%、肠杆菌属占6.74%、沙门氏菌属占12.52%、志贺氏菌属占3.46%、葡萄球菌属占12.58%、青霉菌属占12.75%、曲霉菌属占12.24%。2.猪稀释精液中对分离埃希菌属菌种抑制效果好的为环丙沙星(抑菌圈直径为28.3mm)、复方新诺明(抑菌圈直径为31.2 mm)和氯霉素(抑菌圈直径为26.7 mm),与其他抗生素抑菌效果相比差异显著(P0.05);对普通变形杆菌菌种抑制效果好的为复方新诺明(抑菌圈直径为34.7 mm)和丁胺卡那(抑菌圈直径为32.1 mm),与其他抗生素抑菌效果相比差异显著(P0.05);对奇异变形杆菌菌种抑制效果好的为复方新诺明(抑菌圈直径为38.1 mm)、氨苄西林(抑菌圈直径为45.1 mm)、丁胺卡那(抑菌圈直径为38.7 mm)和头孢唑林(抑菌圈直径为39.2 mm),与其他抗生素抑菌效果相比差异显著(P0.05);对分离肠杆菌属菌种抑制效果好的为丁胺卡那(抑菌圈直径为45.3 mm),与其他抗生素抑菌效果相比差异显著(P0.05);对分离沙门氏菌属菌种抑制效果好的为氯霉素(抑菌圈直径为38.7 mm),与其他抗生素抑菌效果相比差异显著(P0.05);对分离志贺氏菌属菌种抑制效果好的为庆大霉素(抑菌圈直径为37.9 mm),与其他抗生素抑菌效果相比差异显著(P0.05);对分离葡萄球菌属菌种抑制效果好的为环丙沙星(抑菌圈直径为20.1 mm)和复方新诺明(抑菌圈直径为22.9 mm),与其他抗生素抑菌效果相比差异显著(P0.05);对分离青霉菌属菌种抑制效果好的为复方新诺明(抑菌圈直径为1.8 mm)和红霉素(抑菌圈直径为2.3 mm),与其他抗生素抑菌效果相比差异显著(P0.05);曲霉菌属菌种对丁胺卡那、氯霉素、庆大霉素和青霉素均不敏感,其他抗生素对曲霉属菌种的抑菌效果也差异不显著(P0.05)。3.复方新诺明2.5万IU/L+庆大霉素20万IU/L、环丙沙星60万IU/L+丁胺卡那40万IU/L+氯霉素40万IU/L和环丙沙星60万IU/L+复方新诺明1.6万IU/L+头孢唑林40万IU/L三种抗生素联合使用和单用青霉素100万IU/L加入稀释液保存精液与空白对照组比较。稀释后和保存的第1 d,不同抗生素使用方案对精子活率影响差异不显著(P0.05);从保存第1.5 d起,复方新诺明+庆大霉素和环丙沙星+丁胺卡那+氯霉素保存精子活率显著高于其他处理(P0.05);从保存第3 d起,复方新诺明+庆大霉素保存精子活率显著高于其他处理(P0.05)。不同组合抗生素的有效保存时间为复方新诺明+庆大霉素环丙沙星+丁胺卡那+氯霉素环丙沙星+复方新诺明+头孢唑林青霉素=空白对照组,因而猪精液常温保存最佳抗生素使用方案是复方新诺明2.5万IU/L+庆大霉素20万IU/L。
[Abstract]:......
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:S828
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,本文编号:1474448
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