H9亚型流感病毒数字RT-PCR检测方法的建立与应用

发布时间：2018-02-13 08:23

  本文关键词： H亚型流感病毒 数字RT-PCR 实时定量RT-PCR　出处：《中国家禽》2017年21期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：通过数字RT-PCR和实时定量RT-PCR两种方法的比对试验,建立快速检测H9亚型流感的数字RT-PCR方法。利用同一对引物和探针,以梯度稀释的方法测定这两种方法针对H9亚型流感的灵敏性、特异性及重现性。结果显示:两种方法均能够检测出104倍稀释的H9亚型流感病毒,而数字RT-PCR可以检测出单个微滴中的H9亚型流感病毒,其灵敏度性高于实时定量RT-PCR;两种方法的特异性和重复性都较好,对H3N2、H4N2、H6N2等亚型流感病毒均未有扩增反应。数字RT-PCR方法比实时定量RT-PCR具有更高的灵敏度,在快速检测H9亚型流感病毒方面可发挥重要作用。
[Abstract]:A digital RT-PCR method for rapid detection of H9 subtype influenza was established by comparing the methods of digital RT-PCR and real-time quantitative RT-PCR. Using the same pair of primers and probes, the sensitivity of these two methods for H9 subtype influenza was determined by gradient dilution method. Specificity and reproducibility. The results showed that both methods could detect 104-fold diluted H9 subtype influenza virus, while digital RT-PCR could detect H9 subtype influenza virus in a single microdrop. The sensitivity of the two methods was higher than that of real-time quantitative RT-PCR, the specificity and reproducibility of the two methods were better, and there was no amplification reaction to subtype H _ 3N _ 2H _ 4N _ 2H _ 6N _ 2. The digital RT-PCR method was more sensitive than real-time quantitative RT-PCR. It can play an important role in rapid detection of H 9 subtype influenza virus.
【作者单位】： 国家质量监督检验检疫总局口岸传染病检测重点实验室;
【基金】：国家质量监督检验检疫总局科研项目(2014IK248)
【分类号】：S852.65

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本文编号：1507727