表达绿色荧光蛋白猪种布鲁菌的构建

发布时间：2018-02-14 17:32

  本文关键词： 布鲁菌 构建 表达绿色荧光　出处：《中国兽医学报》2017年06期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：为了更直观的观察猪种布鲁菌在宿主细胞/宿主体内的活动规律,本研究首先应用PCR技术扩增pEGFP-N1质粒的N1基因,与pMD18-T载体连接后,成功构建PMD18-N1质粒;进而应用XbalⅠ与SacⅡ限制性内切酶,将PMD18-N1质粒与pBBR1MCS-6质粒分别进行双酶切,并将N1片段反向连接于PBBR1MCS-6载体上,经菌液PCR鉴定与双酶切鉴定,证明成功构建了PBBR1MCS-N1质粒;在此基础上,将PBBR1MCS-N1质粒电转化至猪种布鲁菌感受态细胞,通过含氯霉素的TSA培养基筛选、PCR鉴定、荧光鉴定及菌株的传代稳定性试验与培养特性的观察,最终获得了可稳定表达绿色荧光的猪种布鲁菌。
[Abstract]:In order to observe the activity regularity of the porcine Brutus in the host cell / host , we first applied the PCR technique to amplify the N1 gene , and then to construct the pMD18 - N1 plasmid . Then , the pMD18 - N1 plasmid was transformed into the plasmid pBBR1MCS - 6 by PCR . The results showed that the PBBR1MCS - N1 plasmid was transformed into the PBBR1MCS - 6 vector .

【作者单位】： 山东绿都生物科技有限公司;山东省滨州畜牧兽医研究院;
【基金】：山东省自然资金项目(ZR2013CQ005)
【分类号】：S852.61

【参考文献】

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2 邓超;黄大f ;宋福平;;绿色荧光蛋白及其应用[J];中国生物工程杂志;2011年01期

3 张雨丽;张桂征;苏红梅;蒙艺英;闭立辉;;绿色荧光蛋白在转基因研究中的应用[J];生物技术通报;2010年09期

4 殷文武;孙辉;;中国布鲁氏菌病疫情形势及对策建议[J];疾病监测;2009年07期

5 倪培华,温惠萍,王丹艺;绿色荧光蛋白及其应用[J];中国实验诊断学;2001年05期

【共引文献】

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本文编号：1511232