复方磺胺嘧啶混悬液在肉鸡体内的生物等效性及残留检测方法研究

发布时间：2018-02-15 09:43

本文关键词： 磺胺嘧啶甲氧苄啶生物等效性 UPLC-MS　出处：《中国农业科学院》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：磺胺嘧啶(Sulfadiazine,SD)是一类人工合成的苯磺酰胺类药物,是广泛应用于兽医临床的广谱抑菌药物,对多种革兰氏阳性菌和某些革兰氏阴性菌具有较显著的抑菌效果;甲氧苄啶(Trimethoprim,TMP)又名甲氧苄氨嘧啶,属于人工合成的二氨基嘧啶类化合物,主要与磺胺类药物组成复方制剂,用于扩大抗菌谱、增强抗菌活性,在临床上广泛应用。复方嘧啶混悬液是白色或淡黄色混悬液,主要成分为磺胺嘧啶(SD)和甲氧苄啶(TMP),属于广谱抗菌药,主要用于敏感细菌所致的鸡、鸭等的细菌性疾病及原虫感染。长期及不合理使用磺胺类药物会造成药物在畜产品中的残留,对动物本身来说,饲料中磺胺类药物过量,对动物肌体也有损害并影响生产性能,进而破坏人体正常功能同时对环境也造成损害。目前我国与欧盟等其他国家与地区对磺胺类药物的最高残留限量也做了明确的规定,因此,动物性食品中的磺胺类药物残留检测对人类的健康有着重要意义。本文旨在建立一种简单、快速、灵敏的同时检测血浆中磺胺嘧啶与甲氧苄啶浓度的超高液相色谱质谱联用方法,并应用于生物等效性研究;并建立了同时检测鸡肉与鸡肝中磺胺嘧啶与甲氧苄啶的液相色谱串联质谱的残留检测方法,主要结论如下:1.为保证生物等效性实验顺利进行,本文先对两种复方制剂进行含量测定。本次含量测定依照进口兽药质量标准分别对参比制剂与受试制剂进行测定,按照外标法以峰面积计算含量,结果:磺胺嘧啶在参比和受试制剂的含量分别为标示量的99.78%、99.82%,甲氧苄啶在参比与受试制剂中的含量分别为标示量的99.15%、97.66%,表明复方磺胺嘧啶混悬液的受试与参比制剂含量无显著差异,为生物等效性实验奠定基础。2.建立了同时检测血浆中磺胺嘧啶与甲氧苄啶的超高液相色谱质谱联用方法。样品经甲醇提取,超高液相色谱质谱联用仪测定分析,内标法定量。结果显示:两种药物在血浆中的线性相关系数R2都大于0.99,准确度与精密度采用四个浓度的标准添加法来考察,日内与日间的相对标准偏差分别在1.76-13.41%,2.3-10.6%范围内,平均回收率在80-110%范围内,且稳定性良好,磺胺嘧啶与甲氧苄啶在血浆中的检测限分别为0.05μg/m L,0.01μg/m L。3.生物等效性研究:采取平行设计,受试组与参比组各40只鸡,单次口服灌胃给药,复方嘧啶混悬液以总剂量38.4mg/kg给药,分别在0h(给药前)、0.25、0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、5、8、12、24、36、48h翅下静脉采血,血浆样品经建立的同时检测磺胺嘧啶与甲氧苄啶的超高液相色谱质谱联用法测定,软件DAS3.0分析,结果表明:受试制剂AUC与Cmax分别在参比制剂速服宁80-120%,70-143%(对数转换)的等效范围之内,表明复方磺胺嘧啶混悬液受试制剂与参比制剂速服宁是生物等效的。4.建立同时检测鸡肉与鸡肝中的磺胺嘧啶与甲氧苄啶的液相色谱-串联质谱的残留检测方法,样品经乙腈提取,正己烷除脂,浓缩后乙腈复溶,液相色谱串联质谱仪检测,内标法定量。结果显示:两种药物在鸡肉与鸡肝中的线性相关系数R2都大于0.99、且日间与日内精密度在2.2%-10.2%之间,回收率在88%-109%范围内,稳定性良好,磺胺嘧啶与甲氧苄在鸡肉中的检测限为4μg/kg,0.8μg/kg,在肝中的检测限分别为20μg/kg,4μg/kg,并将方法应用于生物等效性实验后实际组织样品的测定,结果证明了本方法可行。综上所述,本文建立了同时检测血浆中磺胺嘧啶与甲氧苄啶的液相色谱质谱联用方法,应用于生物等效性研究,表明复方混悬嘧啶混悬液受试与参比制剂是等效的;本文建立的残留检测方法经实际样品,方法可行。
[Abstract]:A method for the determination of sulfanilamide drug residues in animal products by high performance liquid chromatography - mass spectrometry was established . The results showed that the content of sulfanilamide drug was 99.78 % , 99.82 % and TMP in animal products . The results showed that the linear correlation coefficients between the two drugs were 0 . 05 渭g / kg , 0 . 25 , 0 . 5 , 1 , 1.5 , 2 , 2.5 , 3 , 4 , 5 , 1 , 1.5 , 2 , 2.5 , 3 , 4 , 5 , 8 , 12 , 24 , 36 , 48 h .

【学位授予单位】：中国农业科学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S859.84

【参考文献】