狂犬病病毒G蛋白V区特异性单克隆抗体的制备与鉴定

发布时间：2018-02-24 01:49

  本文关键词： 狂犬病病毒 糖蛋白 真核表达 单克隆抗体　出处：《中国兽医科学》2017年05期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：为制备狂犬病病毒糖蛋白(G蛋白)特异性单克隆抗体(McAb)及鉴定其识别范围,采用人工合成多肽"PPDQLVNLHDFRSDEIEHLVVEE"与KLH的偶联物免疫小鼠,经筛选制备出1株阳性杂交瘤细胞,记作4D3,其亚类鉴定为IgG2b/κ链。构建了真核表达载体pCAGGS-G/pCAGGS-13G,经鉴定可正确表达G蛋白,用于鉴定McAb。免疫荧光与Western-blot分析显示,该株McAb与真核表达的人工减毒株LBNSE G蛋白可发生特异反应,而与强毒株IMDRV-13的G蛋白不反应。本试验结果可为进一步研究G蛋白的结构、功能和毒株的初步筛查提供参考。
[Abstract]:In order to prepare monoclonal antibody against rabies virus glycoprotein (G protein) and identify its recognition range, mice were immunized with a conjugate of synthetic polypeptide "PPDQLVNLHDFRSDEIEHLVVEE" and KLH. The eukaryotic expression vector pCAGS-G / pCAGGS-13G was constructed. The recombinant plasmid pCAGS-G / pCAGGS-13G was identified and used to identify the G protein. Immunofluorescence and Western-blot analysis showed that the McAb could react specifically with the LBNSE G protein. The results can provide a reference for further study on the structure, function and screening of G protein.
【作者单位】： 中国农业科学院特产研究所特种经济动物分子生物学重点实验室;内蒙古农业大学兽医学院;
【基金】：公益性行业(农业)科研专项(201303042) 国家自然科学基金面上项目(31572505)
【分类号】：S852.655

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