黄芪多糖对断奶仔兔免疫功能的影响

发布时间：2015-03-03 19:13

唐姣玉1,袁自强2,何理平3
（1.湖南省衡阳师范学院生命科学系，湖南 衡阳  421008；2.湖南省衡阳市石鼓区农村工作办公室， 湖南 衡阳  421001
3.南华大学实验动物学部，湖南 衡阳  421001）

 

摘要：为研究黄芪多糖对仔兔免疫功能的影响，试验选取30日龄断奶仔兔80只，随机分为4组，每组20只。对照组饲喂基础日粮，试验组，分别在基础日粮中加入100、200 和400 mg/kg的黄芪多糖，试验期为28 d。结果表明，试验各组免疫器官指数、T淋巴细胞阳性率极显著高于对照组（P＜0.01），IgA和IgG含量显著高于对照组（P＜0.05）。结果提示，在饲料中添加黄芪多糖可以增强仔兔的免疫功能。
关键词：黄芪多糖；断奶仔兔；生长性能；免疫功能
中图分类号：S829.1                 文献标识码：A                 文章编号：1007－273X（２０１３）０5-0007-02

 

黄芪属豆科多年生草本植物，是一种常用中药，味甘、性温，具有补气升阳、固表止汗、托毒排脓和生肌等功效［1］。黄芪多糖（Astragalus polysacharin，APS）是黄芪重要的天然有效成分，其主要成分为葡萄糖和阿拉伯糖的多聚糖，具有增强免疫功能、提高巨噬细胞活性、双向调节血糖的作用［2］，用其制成的静脉注射液适用于化疗后的滋补，可提高人体的免疫力［3］。断奶仔兔生长发育快，抗病性差，在生产中农户散养较多、管理粗放，普遍存在死亡率较高现象［4］。本研究用黄芪多糖作为断奶仔兔饲料添加剂代替抗生素类药物，研究仔兔在断奶应激和饲料配制较粗情况下，黄芪多糖对断奶仔兔免疫功能的影响，旨在为开发家畜饲料绿色添加剂提供科学依据。
1  材料与方法
1.1  基础日粮
肉兔全价颗粒料在南华大学实验动物中心购买。配方比例为：玉米 30%、高粱2%、麸皮12%、豆粕23%、草粉30%、骨粉2.5%、食盐0.5%。其营养水平为：粗蛋白18.08%，消化能 11.02 MJ/kg，粗纤维0.9%，钙0.86%，磷 0.69%。
1.2  试验动物与材料
    试验用仔兔购于南华大学实验动物中心。所使用的黄芪多糖为实验室提取，纯度60%。
1.3  试验设计
试验期从2012年10月12日至2012年11月16日，预试期为7 d，正试期为28 d，在衡阳师范学院生物科学实验室进行。将80只30日龄断奶仔兔按体重随机分为4组，每组20只。对照组饲喂基础日粮，试验1组、试验2组、试验3组分别在基础日粮中加入100、200和400 mg/kg黄芪多糖。
1.4  样品的采集与处理
试验结束前禁食12 h，颈静脉采血5 mL缓慢注入洁净离心管内，静置3 h，3 000 r/min离心10 min，制备血清，并将血清分装到1mL离心管中冷冻保存备用。再将采血处理后的兔子颈动脉放血致死，取其胸腺和脾脏，并剔除脂肪。
1.5  指标的测定
1.5.1  免疫器官指数的测定  迅速称取已剔除脂肪的脾脏和胸腺的鲜重，并计算脾脏和胸腺指数。
    免疫器官指数=器官重/活体重
1.5.2  T淋巴细胞阳性率的测定  采用α-醋酸萘酯酶(ANAE)法［5］。制备淋巴细胞悬液，涂片，自然风干后，浸入 37 ℃孵育液中孵育40~60 min，自来水冲洗片刻，滤纸吸干；2％甲基绿溶液染色 1~5 min，自来水冲洗，滤纸吸干，镜检。凡胞浆内出现大小、数量不等深红色颗粒的为 ANAE阳性细胞(T淋巴细胞)，，计算 200个淋巴细胞中的ANAE阳性细胞率。
1.5.3  免疫球蛋白的测定  采用间接酶联免疫吸附法测定免疫球蛋白IgA、IgG的含量。
1.6  数据处理及分析
    试验数据采用SPSS15.0软件进行统计分析。
2  结果与分析
2.1  黄芪多糖对仔兔免疫器官指数的影响
    由表2可以看出，试验2组仔兔脾脏指数最高，极显著高于试验1组、试验3组和对照组（P＜0.01）；试验1组和试验3组脾脏指数次之，均极显著高于对照组（P＜0.01），试验1组和试验3组之间差异不显著（P＞0.05）。对于胸腺指数，试验2组显著高于试验1组和试验3组（P＜0.05）, 试验1组和试验3组又显著高于对照组（P＜0.05），试验1组和试验3组之间差异不显著（P＞0.05）。
2.2  黄芪多糖对仔兔T淋巴细胞数量的影响
    试验结束时，对照组、试验1组、试验2组和试验3组的T淋巴细胞阳性率分别为（62.35±6.30）%、（78.64±6.20）%、（98.32±5.57）%和（96.21±6.15）%，试验2组与试验3组之间差异不显著（P＞0.05），但都极显著高于试验1组（P＜0.01），3个试验组极其显著高于对照组（P＜0.01）。
2.3  黄芪多糖对仔兔免疫球蛋白的影响
    由表3可知，免疫球蛋白IgA含量试验2组显著高于试验1组和试验3组（P＜0.05），试验1组和试验3组显著高于对照组（P＜0.05），试验1组和试验3组之间差异不显著（P＞0.05）。而免疫球蛋白IgG的含量各试验组显著均高于对照组（P＜0.05），试验组之间差异不显著（P＞0.05）。
3  小结与讨论
脾脏和胸腺是兔的重要的免疫器官。一般认为，免疫器官重量减少是免疫抑制所致，免疫器官重量增加是免疫增强的表现［6,7］。本研究发现，在仔兔饲料中添加黄芪多糖可以显著提高仔兔脾脏和胸腺指数，说明黄芪多糖可以促进仔兔免疫器官综合发育，提高机体的免疫功能。
ANAE阳性淋巴细胞率反映了成熟T淋巴细胞的含量，代表了机体细胞免疫水平。本研究中，黄芪多糖添加100、20和400 mg/kg可分别增加ANAE阳性淋巴细胞率26.13%、57.69%和54.31%。说明添加黄芪多糖可以显著提高仔兔细胞免疫水平。
免疫球蛋白是动物受到抗原刺激后，体内产生的能与抗原特异性相互作用的一类球蛋白。IgG和IgA是仔兔体内两种重要的免疫球蛋白，IgG是生物体液内主要的免疫球蛋白，约占血液中总免疫球蛋白含的75%，是机体抗感染免疫的主力抗体［8］。IgA在血清中的含量仅次于IgG，占血清免疫球蛋白总量的10%～20%，在抵抗病原入侵方面极其重要［9］。本研究中在仔兔饲料中添加免疫球蛋白，能显著提高仔兔的IgG和IgA的含量，说明仔兔的体液免疫功能显著增强。
参考文献：
［1］ 苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术［M］.北京：人民卫生出版社,2003.
［2］ 刘明研.黄芪多糖对犬免疫指标的影响［J］.黑龙江畜牧兽医,2011,（13）:142-144.
［3］ 楊金兰,武  正.应用150-CALC/GPC色谱仪测试黄芪多糖的分子量及其分布［J］.太原工业大学学报,1994,25（4）：77-84.
［4］ 王凤霞,王红芹.黄芪茎叶粉对肉兔生长性能及免疫功能的影响［J］.江苏农业科学,2012,（5）:162-163.
［5］ 曹澎泽.兽医微生物学与免疫学试验［M］.北京：中国农业出版社,1985.
［6］ 骆先虎,倪以祥. 黄芪多糖对断奶仔猪生产性能的影响［J］.中国饲料,2012（3）:22-24.
［7］ 刘可园,刘郝佳,刘诚刚,等.大蒜茎秆对肉兔生产性能和免疫功能的影响［J］.东北农业大学学报,2012（6）:41-45.
［8］ 杜念兴.兽医免疫学［M］.北京：中国农业出版社,1995.
［9］ 于  船.中兽医学［M］.北京：中国农业出版社,1987.

 

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