H9N2亚型禽流感病毒HA基因在昆虫细胞中的表达

发布时间：2018-03-19 13:09

  本文选题：HN亚型禽流感病毒　切入点：HA蛋白　出处：《基因组学与应用生物学》2017年03期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：为了获得具有良好免疫活性的H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白,本研究利用Bac-to-Bac昆虫-杆状病毒表达系统对H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白进行表达。运用PCR对H9N2亚型禽流感病毒HA基因进行扩增,将HA基因连接于转移载体pFastBacDual的BamHⅠ和HindⅢ两个酶切位点之间,构成pFastBacDual-HA重组载体;将pFastBacDual-HA转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,利用蓝白斑筛选法和PCR方法对阳性菌落筛选重组杆粒Bacmid-HA;重组杆粒Bacmid-HA对Sf9昆虫细胞进行了转染,获得重组杆状病毒rBV-HA;运用SDS-PAGE电泳和Western blotting分析rBV-HA感染的细胞和细胞上清。结果表明,重组HA蛋白大小约为65 kD;Western blotting分析显示,HA蛋白与免疫H9N2禽流感病毒后获得的阳性血清具有良好的特异性反应,为进一步研制针对HA蛋白的H9N2亚型AIV亚单位疫苗和研发H9亚型ELISA抗体检测试剂盒奠定了基础。
[Abstract]:In order to obtain HA protein of H9N2 subtype avian influenza virus with good immune activity, In this study, Bac-to-Bac insect-baculovirus expression system was used to express HA protein of H9N2 subtype avian influenza virus, and PCR was used to amplify HA gene of H9N2 subtype avian influenza virus. The HA gene was ligated between the BamH 鈪，

本文编号：1634399