不同水平的单宁对瘤胃主要纤维降解细菌纤维降解特性和细胞形态结构的影响

发布时间：2018-03-26 08:57

  本文选题：瘤胃纤维素降解细菌　切入点：单宁　出处：《内蒙古农业大学》2017年硕士论文

【摘要】：本研究从内蒙古绵羊瘤胃内容物中分离瘤胃纤维素降解细菌,通过生理生化特性结合16SrDNA序列分析技术鉴定菌种·,体外培养分离出的瘤胃纤维降解细菌,分别添加浓度为0、100、200、400、600(μg/mL)的单宁,研究其对纤维降解细菌生长特性、体外发酵参数、纤维降解特性以及细菌形态结构的影响;挑选对细菌生长和纤维降解影响较大的单宁浓度,添加单宁浓度二倍的聚乙二醇(PEG),通过纤维降解率、纤维素酶活力及发酵参数等指标的检测,并用透射电镜观察细菌的形态,研究添加PEG是否会屏蔽单宁对纤维降解细菌的影响。得出以下试验结果:1.本试验从绵羊瘤胃中分离得到了 8株纤维降解细菌,经鉴定两株为黄色瘤胃球菌(F1、F2)、两株为产琥珀酸丝状杆菌(FS1、FS2)、两株为白色瘤胃球菌(A1、A2)、两株为链球菌(S1、S2)。2.(1)体外培养添加单宁后抑制了瘤胃纤维降解细菌的生长,这种抑制作用随单宁浓度增加而增强;(2)1OOμg/mL和200μg/mL单宁显著降低了 F2、FS1、S1、S2的产气量(户0.05),400μg/mL和600μg/mL单宁显著降低8株纤维降解细菌的产气量(户0.05);(3)各株菌发酵液pH随单宁浓度升高有升高的趋势;(4)添加100μg/mL单宁显著降低除产琥珀酸丝状杆菌FS1和FS2外其他6株菌发酵液的NH3-N 浓度(P0.05),200μg/mL 单宁显著降低菌株 F2、FS1、FS2、A2、S1、S2发酵液的NH3-N浓度(P0.05),400μg/mL和600μg/mL单宁显著降低8株细菌体外发酵NH3-N浓度(P0.05);(5)添加10Oμg/mL和200μg/mL单宁后除菌株S2外,其他菌株菌体蛋白浓度显著降低(P0.05),400μg/mL和600μg/mL单宁显著降低8株菌菌体蛋白浓度(P0.05);(6)10μg/mL单宁显著降低F1、F2、FS1、A2、S1和S2的乙酸、丙酸、丁酸和总VFA浓度(P0.05),显著降低FS2的乙酸、丁酸、总VFA浓度(P0.05);200μg/mL单宁显著降低FS1、FS2、A2、S1和S2的乙酸、丙酸、丁酸和总VFA浓度(P0.05),显著降低F1的丙酸、丁酸和总VFA浓度(P0.05);400μg/mL单宁显著降低F2、FS1、A2、S1和S2的乙酸、丙酸、丁酸和总VFA浓度(P0.05),显著降低F1、F2和FS2的乙酸、丁酸、总VFA浓度(P0.05):600μg/mL单宁酸显著降低F1的丙酸、丁酸、总VFA浓度和FS2的乙酸、丁酸、总VFA浓度(P0.05),显著降低FS1、A2、S1、S2的乙酸、丙酸、丁酸和总VFA浓度;(7)100μg/mL和200μg/mL单宁显著抑制了菌株FS1、S1、A2的滤纸酶活力、羧甲基纤维素酶活力、微晶纤维素酶活力和水杨苷酶活力,并随着单宁浓度升高酶活力显著降低(P0.05),400μg/mL和600μg/mL单宁显著抑制8株菌纤维素酶活力(P0.05);(8)100μg/mL和200μg/mL单宁显著降低菌株F1、F2、FS2和A1纤维素降解率(P0.05),400μg/mL和600μg/mL单宁显著抑制8株细菌纤维素降解率(P0.05)。(9)添加400μg/mL单宁可使菌体塌陷、变形,破坏细菌细胞膜,使菌体皱缩。3.添加2倍单宁浓度的PEG能够减弱单宁对瘤胃纤维降解细菌生长的影响,菌株的产气量、菌体蛋白浓度、纤维素酶活力以及纤维素降解率均显著高于单宁添加组(P0.05),但各菌株添加PEG后的产气量,纤维素酶活力以及纤维素降解率均低于对照组。
[Abstract]:The study on separation of rumen cellulolytic bacteria from the rumen of the Inner Mongolia sheep, the physiological and biochemical characteristics and 16SrDNA sequence analysis, strain identification, rumen cellulolytic bacteria isolated from cultured in vitro were added at a concentration of 0100200400600 (g/mL) of tannin, on the cellulolytic bacteria growth characteristics, fermentation parameters in vitro. Effect of fiber degradation characteristics and morphology of bacteria; select larger tannin concentration effect on the growth and cellulolytic bacteria, adding polyethylene glycol tannin concentration two times (PEG), the fiber degradation rate, detection of cellulase activity and fermentation parameters, and the observation of bacterial morphology by transmission electron microscope, to study whether adding PEG will shield the tannin on cellulolytic bacteria. The following results: 1. of the 8 strains were isolated from the rumen of fine fiber degradation 鑿，

本文编号：1667205