Taqman-MGB探针法检测炭疽杆菌
本文选题:炭疽杆菌 切入点:Taqman-MGB法 出处:《中国兽医学报》2016年11期
【摘要】:根据GenBank中炭疽杆菌的主基因组上gyrA基因,毒力因子px01上pagA基因和侵袭因子px02上的CapA基因分别设计引物和对应Taqman-MGB探针,建立了检测炭疽杆菌的实时定量PCR方法。该方法具有良好特异性,仅对炭疽杆菌检测结果为阳性,而与蜡样芽孢杆菌、苏云金杆菌、巨大芽孢杆菌、沙门菌、大肠杆菌、链球菌、铜绿假单孢杆菌无交叉反应,检测灵敏度最低可达100copies/μL。对24份皮毛盲样和120份送检样品检测结果表明建立的定量PCR方法与商业化定量PCR试剂盒的符合率为100%。Taqman-MGB探针方法灵敏、特异、重复性好,可应用于炭疽杆菌的快速诊断与监测。
[Abstract]:Primers and corresponding Taqman-MGB probes were designed according to the gyrA gene on the main genome of Bacillus anthracis in GenBank, the pagA gene on the virulence factor px01 and the CapA gene on the invasive factor px02. A real-time quantitative PCR method for the detection of Bacillus anthracis was established. The method has good specificity and is positive only for Bacillus anthracis, Bacillus thuringiensis, Bacillus megaterium, Salmonella, Escherichia coli, Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis, Bacillus cereus, E. coli, Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis. Streptococcus, Pseudomonas aeruginosa, no cross reaction, The detection sensitivity was the lowest up to 100copies/ 渭 L. the results showed that the coincidence rate between the established quantitative PCR method and the commercial quantitative PCR kit was that the 100%.Taqman-MGB probe method was sensitive, specific and reproducible. It can be used in rapid diagnosis and monitoring of Bacillus anthracis.
【作者单位】: 河南出入境检验检疫局检验检疫技术中心;河南农业大学;
【基金】:河南省科技攻关项目(102102110129)
【分类号】:S852.616
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,本文编号:1682407
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