免疫共沉淀结合质谱筛选绵羊BMPR-1B互作蛋白的研究

发布时间：2018-03-30 22:18

  本文选题：BMPR-B　切入点：真核表达　出处：《家畜生态学报》2017年03期

【摘要】：为研究与绵羊骨形态发生蛋白受体1B(BMPR-1B)相互作用的蛋白,试验通过构建的pcDNA3.1a-BMPR-1B真核表达载体并在Sf9昆虫细胞中特异性表达,采用免疫共沉淀的方法富集绵羊卵巢中与BMPR-1B蛋白的结合蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳分离免疫共沉淀复合物,MALDI-TOF/TOF结合数据库检索方法筛选鉴定与BMPR-1B相互作用蛋白。结果表明,试验获得的GDF5、BMP2、BMP4、RhoD和HSP 10蛋白与BMPR-1B互作,GDF5和BMP4作为BMPR-1B蛋白的配体来发挥其生物学功能,BMP2、RhoD和HSP 10在卵泡发育上起重要作用。RhoD和HSP 10与棉羊繁殖主效基因相关联。研究结果为进一步研究BMPR-1B的功能和研究BMPR-1B作为绵羊高繁主效基因的机理和分子调控机制提供了新的思路与方法。
[Abstract]:In order to study the protein interacting with sheep bone morphogenetic protein receptor 1BMP BM-1B, the eukaryotic expression vector of pcDNA3.1a-BMPR-1B was constructed and expressed specifically in Sf9 insect cells.SDS-PAGE gel electrophoresis (SDS-PAGE) was used to isolate the MALDI-TOF / TOF binding database from sheep ovaries by immunoprecipitation method for screening and identification of BMPR-1B interacting proteins.The results showed that GDF5, BMP2, BMP4, RhoD and HSP 10 proteins interacted with BMPR-1B as ligands of BMPR-1B protein to play their biological functions. Rod D and HSP 10 played an important role in follicular development. RhoD and HSP 10 were associated with major reproductive genes of cotton sheep.The results provided a new idea and method for further study on the function of BMPR-1B and the mechanism and molecular regulation mechanism of BMPR-1B as the main gene of sheep high propagation.
【作者单位】： 青海大学农牧学院;西北农林科技大学动物科技学院;甘肃农业大学动物科学技术学院;
【基金】：青海省科技计划项目(2016-ZJ-935Q) 国家自然科学基金(31260547)
【分类号】：S826

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本文编号：1687902