植物乳杆菌对大肠杆菌致猪肠上皮细胞损伤的保护作用研究
本文选题：植物乳杆菌 切入点：大肠杆菌 出处：《甘肃农业大学》2017年硕士论文
【摘要】：乳酸菌作为一种重要的益生菌,可发挥其益生作用改善仔猪肠道健康,缓解大肠杆菌等致病菌引起的腹泻,但其作用机理仍在探究当中。本试验以猪肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IPEC-J2细胞)为体外培养模型,研究了植物乳杆菌在外源致病菌大肠杆菌存在时,对IPEC-J2细胞的黏附、存活及免疫应答的影响。试验一研究了植物乳杆菌对IPEC-J2细胞的黏附以及对大肠杆菌黏附IPEC-J2细胞的抑制作用;试验二研究了植物乳杆菌对大肠杆菌感染IPEC-J2细胞形态和存活的影响;试验三研究了植物乳杆菌对大肠杆菌感染IPEC-J2细胞免疫应答的影响。试验结果表明:试验一植物乳杆菌对大肠杆菌黏附IPEC-J2细胞的影响:107、108、109CFU/mL浓度的植物乳杆菌均能黏附于IPEC-J2细胞,能够通过竞争、排阻和置换方式抑制大肠杆菌对IPEC-J2细胞的黏附,且具有浓度效应。不同浓度植物乳杆菌对大肠杆菌的黏附抑制均表现为活菌数越高,抑制作用越明显(P0.05)。从总体抑制方式看,竞争和置换抑制效果优于排阻抑制。试验二植物乳杆菌对大肠杆菌感染IPEC-J2细胞形态及存活的影响:107、108 CFU/mL浓度的植物乳杆菌在处理细胞1、2、3 h后,均不影响细胞的形态和存活,而109 CFU/mL浓度植物乳杆菌处理细胞较长时间后,对细胞形态及存活有一定影响;植物乳杆菌和大肠杆菌共培养发现,植物乳杆菌能够缓解大肠杆菌引起的细胞形态损伤及死亡,其中108 CFU/m L浓度的植物乳杆菌作用效果最优。试验三植物乳杆菌对大肠杆菌感染IPEC-J2细胞免疫应答的影响:植物乳杆菌处理细胞后,可促进细胞NOD1(2 h,P0.01)和NOD2(1 h,P0.01)mRNA的表达;植物乳杆菌可以显著抑制大肠杆菌引起的IPEC-J2细胞TLR2、TLR6、NOD2及炎症因子IL6、IL8、TNFαmRNA的过表达(P0.05)。
[Abstract]:As an important probiotic bacteria, lactic acid bacteria can improve the intestinal health of piglets and relieve diarrhea caused by E. coli, but its mechanism is still being explored.The effects of Lactobacillus plantarum on the adhesion, survival and immune response of IPEC-J2 cells in the presence of Escherichia coli were studied.In experiment 1, the adhesion of Lactobacillus plantarum to IPEC-J2 cells and the inhibitory effect of Lactobacillus plantarum on the adhesion of IPEC-J2 cells to Escherichia coli were studied, and the effects of Lactobacillus plantarum on the morphology and survival of IPEC-J2 cells infected with E. coli were studied in experiment 2.The effect of Lactobacillus plantarum on the immune response of IPEC-J2 cells infected with Escherichia coli was studied in experiment 3.The results showed that the effect of Lactobacillus plantarum on the adhesion of Escherichia coli to IPEC-J2 cells was observed. Lactobacillus plantarum at the concentration of 10: 10108109 CFU / mL could adhere to IPEC-J2 cells and inhibit the adhesion of E. coli to IPEC-J2 cells by competition, exclusion and replacement.And has the concentration effect.The adhesion inhibition of different concentrations of Lactobacillus plantarum to Escherichia coli showed that the higher the number of live bacteria, the more obvious the inhibitory effect of P0.05.From the overall inhibition mode, the effect of competition and displacement inhibition is better than that of exclusion inhibition.Effect of Lactobacillus plantarum on morphology and survival of IPEC-J2 cells infected with Escherichia coliAfter treatment with Lactobacillus plantarum for a long time, the cell morphology and survival were affected, and the co-culture of Lactobacillus plantarum and Escherichia coli showed that Lactobacillus plantarum could alleviate the morphological damage and death induced by E. coli.The effect of 108 CFU/m / L Lactobacillus plantarum was the best.The effect of Lactobacillus plantarum on the immune response of IPEC-J2 cells infected by E. coli: after treated with Lactobacillus plantarum, it could promote the expression of NOD1(2 hmAb P0.01 and NOD2(1 HG P0.01mRNA.Lactobacillus plantarum could significantly inhibit the overexpression of TLR2TLR6NOD2 and IL-8TNF- 伪 mRNA in IPEC-J2 cells induced by Escherichia coli.
【学位授予单位】：甘肃农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S816
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，本文编号：1726377
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