弓形虫不同发育时期棒状体颈部蛋白5基因的表达研究

发布时间：2018-04-11 15:49

  本文选题：弓形虫 + 棒状体颈部蛋白　； 参考：《中国畜牧兽医》2017年02期

【摘要】：为探究不同发育时期弓形虫棒状体颈部蛋白5(Toxoplasma gondii rhoptry neck protein 5,TgRON5)基因的表达情况与其毒力的相关性,本试验以Ⅱ型弓形虫PRU虫株作为研究对象,以弓形虫管家基因ACT1作为内参基因,分别对目的基因和内参基因设计特异性引物,通过对各基因建立标准曲线,确定二者扩增效率的一致性后,采用实时荧光定量PCR相对定量法对弓形虫4个不同发育时期(速殖子、缓殖子、未孢子化卵囊及孢子化卵囊)中TgRON5基因的表达情况进行检测与分析。结果显示,TgRON5基因在弓形虫各发育时期均有表达,其中,孢子化卵囊表达水平最高,未孢子化卵囊次之,速殖子较低,缓殖子最低,表明RON5蛋白的合成与分泌与虫体入侵宿主细胞的侵袭力有着密切的关系。本研究结果为阐明TgRON5蛋白参与弓形虫入侵的机理奠定了基础。
[Abstract]:In order to investigate the relationship between the expression of 5(Toxoplasma gondii rhoptry neck protein 5 (TgRON5) gene and its virulence in different developmental stages of Toxoplasma gondii, the Toxoplasma gondii PRU strain was used as the research object, and the Toxoplasma steward gene ACT1 was used as the internal reference gene.Specific primers were designed for the target gene and the internal reference gene respectively. The standard curve of each gene was established to determine the consistency of the amplification efficiency of the two genes.The expression of TgRON5 gene in Toxoplasma gondii (Toxoplasma gondii) at four different developmental stages (tachyzoites, bradyzoites, unsporulated oocysts and sporocystified oocysts) was detected and analyzed by real-time fluorescence quantitative PCR relative quantitative method.The results showed that TgRON5 gene was expressed in all developmental stages of Toxoplasma gondii. Spore oocysts had the highest expression level, followed by unspore oocysts, lower tachyzoites and lowest bradyzoites.The results showed that the synthesis and secretion of RON5 protein were closely related to the invasiveness of host cells.The results laid a foundation for elucidating the mechanism of TgRON5 protein involved in Toxoplasma gondii invasion.
【作者单位】： 安徽农业大学动物科技学院;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室;中国农业大学动物医学院国家动物寄生原虫实验室;
【基金】：国家自然科学基金项目(31302085)
【分类号】：R382.5;S852.7

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本文编号：1736642