新城疫病毒F蛋白在水稻中的表达及检测

发布时间：2018-04-20 11:34

  本文选题：新城疫病毒 + F基因　； 参考：《畜牧兽医学报》2017年06期

【摘要】：旨在研究水稻表达新城疫病毒F蛋白,制备亚单位疫苗。根据GenBank中的新城疫病毒F基因序列以及水稻偏爱性密码子筛选、优化并合成F基因,通过两次载体构建,先使目的基因连在中间载体pMP3上,再连接到pCAMBIA1300植物载体上,通过农杆菌导入水稻愈伤组织中,经过潮霉素抗性筛选,获得表达植株。通过QPCR的方法筛选获得高表达的纯合子株系5株。新城疫抗原试纸条检测和Western blot检测确定F蛋白具有良好的反应原性。本试验为家禽传染病的植物性水稻疫苗研究奠定了基础。
[Abstract]:The purpose of this study was to study the expression of Newcastle disease virus F protein in rice and to prepare subunit vaccine. According to the sequence of Newcastle disease virus F gene in GenBank and the rice preference codon, F gene was optimized and synthesized. The target gene was first linked to the intermediate vector pMP3 and then connected to the pCAMBIA1300 plant vector. Through Agrobacterium tumefaciens introduced into rice callus, hygromycin resistant screening was used to obtain the expressed plants. Five homozygous lines with high expression were screened by QPCR. The detection of Newcastle disease antigen and Western blot confirmed that F protein had good reactivity. This study laid a foundation for the study of plant rice vaccine for poultry infectious diseases.
【作者单位】： 河南农业大学牧医工程学院;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室农业部动物免疫学重点实验室河南省动物免疫学重点实验室;郑州大学生命科学学院;
【基金】：兽用蛋白功能性转基因水稻新品种培育(2016ZX08001006) 公益性行业(农业)科研专项经费项目(201303033)
【分类号】：S852.65

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本文编号：1777581