慢性免疫应激对仔猪骨骼肌纤维亚型的影响及机制初探

发布时间：2018-04-30 17:29

  本文选题：仔猪 + 免疫应激　； 参考：《中国农业科学院》2015年硕士论文

【摘要】：肌纤维亚型的组成直接影响肌内脂肪含量、嫩度以及肉色等肉品质特性。在动物初生阶段极易发生免疫应激。免疫应激导致动物血浆中TNF-α等炎性细胞因子水平急剧升高。体外研究发现,TNF-α可使C2C12细胞中Ⅰ型肌纤维m RNA表达量降低,Ⅱ型肌纤维m RNA表达量升高。由此推测,幼龄动物发生免疫应激时,可能通过TNF-α等调控肌纤维亚型的表达。为验证上述推测,本论文开展了以下研究,为今后通过调控仔猪免疫应激,提高仔猪生产性能,改善猪肉品质提供理论基础。1、免疫应激对仔猪骨骼肌纤维亚型转化的影响选取16头断奶大白仔猪,随机分为对照组、LPS组。LPS组隔天静脉注射Lipopolysaccharide(LPS),初始注射剂量80μg/kg.BW,随后逐次递增30%,对照组注射相应剂量的生理盐水,试验期15 d。研究发现:注射第9天,仔猪血浆中的IL-6、TNF-α和结合珠蛋白仍显著升高,表明仔猪处于慢性免疫应激。骨骼肌中My HC1 m RNA和蛋白表达量显著降低(P0.05),My HC2b m RNA和My HC2蛋白表达量显著升高(P0.05),CaN、PGC-α表达量显著降低(P0.05),背最长肌中氧化酶活性显著降低(P0.05),酵解型酶活性显著升高(P0.05),表明递增注射LPS诱导仔猪慢性免疫应激,导致骼肌肌纤维由Ⅰ型向Ⅱ型转化。2、体内大鼠模型探究TNF-α对骨骼肌纤维亚型转化的影响及机制选取72只4周龄断奶SD雄性大鼠,随机分为对照组、LPS组和单抗组(LPS+TNF-α单抗组),LPS组和单抗组分别在1、3、5、7d腹腔注射LPS,初始注射剂量1 mg/kg.BW,以后每次递增30%,对照组注射相应剂量的生理盐水,单抗组在注射LPS前1h腹腔注射2 mg/kg.BW的英夫利昔。后4周不做任何处理。研究发现:递增注射LPS导致大鼠血清中TNF-α等炎性细胞因子水平升高,同时降低CaN和PGC-α的表达水平,并诱导骨骼肌Ⅰ型向Ⅱ型转化;利用单抗降低TNF-α水平,同时也缓解了骨骼肌纤维亚型的转化,表明肌纤维亚型的转化可能与TNF-α升高有关。停止注射LPS后,MyHC亚型表达量无显著差异,表明免疫应激停止后,其对骨骼肌纤维亚型的影响逐渐消除。3、体外细胞培养探究TNF-α对骨骼肌纤维亚型转化的机制用10%的胎牛血清生长培养基培养C2C12细胞,接种于96孔板和6孔板中,待其融合达到80%后,用2%灭活马血清分化培养基取代生长培养基,诱导分化3 d后,在培养液中加入不同浓度的TNF-α(0 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/m L、20 ng/mL),继续培养3 d后,每个梯度3个重复。研究发现:TNF-α显著提高了MyHC2b/My HC1的比值(P0.05)。表明:TNF-α诱导了肌纤维亚型从Ⅰ型向Ⅱ型的转化。同时TNF-α显著降低胞内Ca2+浓度(P0.05),表明免疫应激升高TNF-α,可能通过下调Ca2+/CaN/PGC-α途径,诱导骨骼肌纤维亚型转化。综上所述,递增注射LPS模拟慢性免疫应激,诱导仔猪、大鼠骨骼肌纤维由Ⅰ型向Ⅱ型转化;这种转化与提高血清中TNF-α水平有关。TNF-α升高可能通过下调Ca2+/CaN/PGC-α途径调控骨骼肌亚型的表达。
[Abstract]:The composition of muscle fiber subtype directly affects meat quality characteristics such as muscle fat content, tenderness and meat color. Immune stress is easy to occur in the newborn stage of animals. The level of inflammatory cytokines such as TNF- 伪 in animal plasma was increased sharply by immune stress. It was found that TNF- 伪 could decrease the expression of type 鈪，

本文编号：1825500