小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达与间接ELISA检测方法的建立

发布时间：2018-05-06 23:04

  本文选题：小反刍兽疫 + N活性蛋白　； 参考：《动物医学进展》2017年01期

【摘要】：小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白是病毒粒子的主要结构蛋白,也是诊断小反刍兽疫的主要靶蛋白。为获得高效表达的可溶性N蛋白,并建立基于N蛋白的小反刍兽疫的间接ELISA检测方法,通过优化密码子、优化表达条件等条件探索,在大肠埃希菌表达系统中获得了高效表达的可溶性N蛋白,进一步基于N蛋白建立了间接ELISA检测方法,该方法对其他相关的羊类病原无交叉反应,其组内与组间变异系数均低于9%,具有良好的重复性。对480份临床血清样品进行检测,同时用法国IDVET竞争ELISA试剂盒进行比较,符合率达到98.33%。本研究为进一步开发成熟的小反刍兽疫抗体检测试剂盒奠定了基础。
[Abstract]:PPRVN protein of small ruminant ruminant virus is the main structural protein of virus particles and the main target protein for diagnosis of small ruminant disease. In order to obtain highly expressed soluble N protein and to establish an indirect ELISA detection method for small ruminant disease based on N protein, the codon and expression conditions were optimized. A highly expressed soluble N protein was obtained in Escherichia coli expression system, and an indirect ELISA detection method based on N protein was established. The coefficient of variation within and between groups was lower than 9 and had good reproducibility. 480 clinical serum samples were detected and compared with French IDVET competitive ELISA kit. The coincidence rate was 98.33%. This study laid a foundation for the further development of mature small animal ruminant antibody detection kit.
【作者单位】： 中国动物疫病预防控制中心;
【基金】：国家重点计划研发项目(2016YFD0500901)
【分类号】：S852.65

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 杭柏林;胡建和;姚四新;王宪文;王丽荣;王选年;刘兴友;;小反刍兽疫病毒蛋白及其功能研究进展[J];信阳师范学院学报(自然科学版);2009年01期

2 刘玉洪;花群义;徐自忠;杨云庆;周晓黎;董俊;尹尚莲;许靖逸;高洪;;小反刍兽疫病毒H糖蛋白基因原核表达载体的构建及表达[J];中国兽医科学;2006年09期

3 刘玉洪;徐自忠;花群义;高洪;许靖逸;;小反刍兽疫病毒分子生物学研究进展[J];动物医学进展;2006年12期

4 辛娟;曲素娟;程尧;;小反刍兽疫病毒的研究进展[J];当代生态农业;2009年Z1期

5 王凡;刘建斌;祝秀梅;;小反刍兽疫病毒研究进展[J];现代生物医学进展;2009年14期

6 蒙学莲;才学鹏;;小反刍兽疫病毒致病性的研究进展[J];中国兽医科学;2010年07期

7 蒙学莲;窦永喜;翟军军;闫丰超;张海瑞;石晓妮;才学鹏;;小反刍兽疫病毒细胞膜受体的鉴定[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2012年09期

8 南文金;王清华;吴晓东;包静月;王志亮;;小反刍兽疫病毒分子生物学与疫苗研究进展[J];中国动物检疫;2009年01期

9 倪伟;才学鹏;乔军;孟庆玲;陈创夫;任艳;;小反刍兽疫病毒融合蛋白基因的克隆、序列分析及表达[J];石河子大学学报(自然科学版);2011年01期

10 龙云凤;周晓黎;杨俊兴;王琼;祝贺;叶玲玲;董俊;吕建强;王金萍;陈朝银;花群义;杨仕标;尹尚莲;徐维佳;艾军;;小反刍兽疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备与初步应用[J];畜牧兽医学报;2012年04期

相关会议论文 前2条

1 王玉红;支海兵;黄炯;;小反刍兽疫病毒在两种Vero细胞中生长特性的研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集（下册）[C];2009年

2 李伟;李刚;范晓娟;张坤;贾风琴;史利军;Hermann Unger;;小反刍兽疫病毒RT-LAMP快速检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集（下册）[C];2009年

相关博士学位论文 前2条

1 张国瑞;小反刍兽疫病毒西藏株N基因人工合成、表达及检测方法建立的研究[D];南京农业大学;2010年

2 翟军军;小反刍兽疫病毒全长cDNA的构建及DNA疫苗的免疫学研究[D];中国农业科学院;2012年

相关硕士学位论文 前10条

1 邓瑞雪;小反刍兽疫病毒囊膜糖蛋白和受体的相互作用研究[D];甘肃农业大学;2016年

2 王建松;小反刍兽疫病毒N75-1株在山羊子宫内膜上皮细胞中的增殖规律研究[D];西北农林科技大学;2016年

3 曹冬伸;小反刍兽疫病毒全长cDNA的构建[D];沈阳农业大学;2016年

4 赵玲娜;小反刍兽疫病毒H蛋白对病毒增殖的影响[D];中国农业科学院;2016年

5 贾凤芹;小反刍兽疫病毒核衣壳（N）蛋白的原核表达[D];中国农业科学院;2008年

6 张忠湛;小反刍兽疫病毒等温扩增快速检测方法的建立[D];吉林大学;2009年

7 杨帆;小反刍兽疫病毒Nigeria 75/1株F基因的克隆、表达及应用研究[D];新疆农业大学;2009年

8 田康乐;小反刍兽疫病毒Nigeria75/1株F基因的克隆表达及单克隆抗体的制备[D];中国农业科学院;2012年

9 刘霞;农杆菌介导小反刍兽疫病毒H、F基因转化苜蓿的初步研究[D];青岛农业大学;2010年

10 赵文姬;小反刍兽疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及F基因的分子特性研究[D];扬州大学;2009年

，

本文编号：1854283