流行性乙型脑炎病毒E蛋白多表位肽在毕赤酵母中分泌表达及其免疫原性研究

发布时间：2018-05-21 17:29

  本文选题：流行性乙型脑炎病毒 + 多表位疫苗　； 参考：《中国预防兽医学报》2017年06期

【摘要】：为构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)E蛋白多表位疫苗,本研究将人工合成的优化后的E蛋白多表位肽(MP)序列克隆入酵母表达载体p PICZα-A,构建分泌型重组酵母表达质粒p PICZ-MP,经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母X-33,阳性重组子经甲醇诱导表达,亲和层析纯化重组蛋白(rMP)。通过测定rMP免疫小鼠的抗体水平、抗体亚型、中和抗体和CTL,以评价该多表位疫苗在小鼠模型上的免疫原性。结果表明:成功构建了表达JEV E蛋白多表位抗原的重组酵母菌株X33(pPICZ-MP),能分泌表达多表位肽r MP。纯化后的r MP免疫小鼠产生了较强的体液免疫和细胞免疫反应,其中和抗体水平、CTL活性均与活病毒疫苗组差异不显著(p0.05),且能保护小鼠免受致死量JEV的攻击。构建的JEV E蛋白多表位疫苗具有良好的免疫原性,能够刺激小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫应答反应,为流行性乙型脑炎多表位疫苗研制提供新的思路。
[Abstract]:In order to construct a multiepitope vaccine of Japanese encephalitis virus (JEV) E protein, In this study, the optimized sequence of E protein polyepitope peptide was cloned into the yeast expression vector p PICZ 伪 -A. the secreting recombinant yeast expression plasmid pPICZ-MPA was constructed. The recombinant yeast expression plasmid pPICZ-MPA was transformed into Pichia pastoris X-33 by Sac 鈪，

本文编号：1920112