双乙酸钠和曲酸对关中黑猪精液常温保存效果的研究

发布时间：2018-05-26 19:21

本文选题：关中黑猪 + 精液　；参考：《西北农林科技大学》2017年硕士论文

【摘要】：稀释粉质量决定了公猪精液稀释后、人工授精前的质量,继而影响输精后母猪的繁殖成绩。由于精液受到细菌的污染是无法避免的,细菌的增殖会对精液保存造成不利影响;同时精子在保存和运输过程中产生的活性氧(ROS)和抗氧化剂之间的不平衡诱导的氧化应激(OS)状态能够损伤精子,因此稀释粉中添加抑菌剂和抗氧化剂是常规选择。目前市场上用于常温保存猪精液的稀释粉主要是针对瘦肉型猪种研发的,对于关中黑猪等培育品种的研究很少。本研究将抑菌剂双乙酸钠(SDA)和抗氧化剂曲酸(Kojic acid)应用到关中黑猪精液的常温保存中,通过抑菌性试验、精子活率、质膜完整率、线粒体完整性、顶体完整率和总抗氧化能力(T-AOC)等指标检测,探究SDA替代庆大霉素的可行性和曲酸对精子的保护作用,为关中黑猪精液稀释粉的研发提供技术支持。本研究主要获得以下结果:1.关中黑猪精液稀释保存过程中检测到的细菌超过100种,保存初期精液中细菌以革兰氏阳性菌居多:葡萄球菌科(Staphylococcus)24.13%、链球菌科(Streptococcus)13.39%、气球菌科(Aerococcaceae)11.84%和芽孢杆菌科(Bacillaceae)6.91%等;随保存时间延长,革兰氏阴性菌以肠杆菌科(Enterobacteriaceae)为主的比例上升,到第5 d占绝大部分(97.76%);2.双乙酸钠对大肠杆菌(Escherichia coli)具有一定的抑制作用,但抑菌效果不如庆大霉素(P0.05)。在LB固体培养基中双乙酸钠对鲁菲不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑菌圈直径大小随浓度增大而显著增大(P0.05);在分别加有鲁菲不动杆菌和金黄色葡萄球菌的LB液体培养基中,其OD值随双乙酸钠浓度增大而显著降低(P0.05)。较高浓度(0.8 g/L)双乙酸钠对鲁菲不动杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制效果与庆大霉素相近(P0.05);3.添加浓度高于0.2 g/L的双乙酸钠对稀释后精液的渗透压有显著影响(P0.05)。BTS液中添加0~0.8 g/L双乙酸钠对精液保存效果呈先增后减的变化。单独添加0.2 g/L双乙酸钠保存至第5 d时,能有效抑制细菌生长,提高精子活率、质膜、顶体和线粒体完整性(P0.05)。BTS液中添加高浓度(1 g/L)的双乙酸钠不利于关中黑猪精子保存;4.BTS液中添加0.2 g/L双乙酸钠替代40%的庆大霉素能够达到等同于250 mg/L庆大霉素对精液的保存效果(P0.05);5.BTS液中添加0.1 g/L浓度以内的曲酸能够有效提高精子质膜、顶体完整性,提升精子的总抗氧化能力(P0.05)。其中0.04 g/L浓度组保存效果最好,保存第5 d时精子活率为61.45%,可将精子有效保存时间延长2 d,0.06 g/L浓度组与之差异不显著(P0.05);6.不同浓度双乙酸钠+曲酸组合整体上相对于空白对照组有利于关中黑猪精子的保存,对活率、顶体完整率均有提高作用,但二者联合使用没有显著的增益效果。综上所述,关中黑猪精液常温保存过程中出现的细菌中革兰氏阴性菌呈递增趋势,其中肠杆菌科(Enterobacteriaceae)占绝大部分;在BTS液中添加0.2 g/L双乙酸钠能够替代40%的庆大霉素,对猪精液常温保存有促进作用;在BTS液中添加0.04 g/L曲酸能够对精子常温保存起到最佳的抗氧化保护效果,但双乙酸钠和曲酸联用没有显著的增益效果。本研究结果对解决猪精液常温保存中抗生素的耐药性和精子的氧化损伤问题具有重要参考意义,同时为自主研发稀释粉产品提供实验依据。
[Abstract]:The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results showed that bacteria could not be prevented from bacterial contamination . In conclusion , the effect of adding 0 . 2g / L of sodium diacetate in BTS solution could increase the sperm membrane , the integrity of acrosome and the total antioxidant capacity of sperm .
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S828

【相似文献】