猪多杀性巴氏杆菌重组抗菌肽ABC转运体ATP结合蛋白诱导的免疫保护研究
本文选题:多杀性巴氏杆菌 + 重组抗菌肽ABC转运体ATP结合蛋白 ; 参考:《中国预防兽医学报》2017年09期
【摘要】:为研究猪多杀性巴氏杆菌(Pm)重组抗菌肽ABC转运体ATP结合蛋白的免疫保护性,本研究采用PCR方法扩增该蛋白基因,并将其克隆于pET-28a(+)中构建重组质粒pET-ABP,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达。分析表明,猪Pm抗菌肽ABC转运体ATP结合蛋白基因为696 bp,编码231 aa,不同血清型的该蛋白基因推导氨基酸序列同源性达99%以上。表达的蛋白分子量约为27 ku。动物实验表明,实验组小鼠三免后第14 d其血清IgG抗体水平显著升高,明显高于对照组。对照组攻毒后3 d存活率为20%,7 d全部死亡;免疫组小鼠攻毒后3 d存活率为80%,7 d存活率为40%。该研究为进一步研制Pm的混合疫苗奠定了基础。
[Abstract]:In order to study the immune protection of ATP binding protein of recombinant antimicrobial peptide ABC transporter from Pasteurella multocida, the gene was amplified by PCR. The recombinant plasmid pET-ABP was cloned into pET-28a () and transformed into E. coli BL21DE3 / IPTG to induce the expression of recombinant protein. The results showed that the ATP binding protein of porcine antimicrobial peptide ABC transporter was more than 99% homologous to the deduced amino acid sequence of different serotypes because of 696 BP encoding 231aa. The molecular weight of the expressed protein is about 27 ku. The level of serum IgG antibody in the experimental group was significantly higher than that in the control group on the 14th day after three immunizations. In the control group, the 3 day survival rate was 20 and 7 days, while in the immunized group, the survival rate was 80 and 7 days, and the survival rate of the mice in the immunized group was 40. This study laid a foundation for the further development of pm mixed vaccine.
【作者单位】: 湖南农业大学动物科学技术学院;湖南农业大学动物医学院;
【基金】:湖南省自然科学基金项目(14JJ4077)
【分类号】:S852.61
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本文编号:1958507
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