β-catenin在绒山羊绒毛生长中的表达变化及作用研究
本文选题:辽宁绒山羊 + β-连环蛋白 ; 参考:《沈阳农业大学》2017年硕士论文
【摘要】:本研究选12只年龄相近,体况良好的辽宁绒山羊作为研究对象,分别在绒毛生长的退行期,休止期,旺盛前期和旺盛期采集皮肤样品。采用相对荧光定量PCR的方法测定皮肤中β-catenin基因表达变化、通过免疫组化和Western Blot方法测定β-catenin蛋白的表达位置及变化;进一步采用毛囊体外培养方法,通过激活β-catenin,测定毛囊生长、形态及基因表达变化,探讨β-catenin在绒山羊绒毛生长中的作用。结果表明:(1)β-catenin基因在绒山羊绒毛生长不同时期皮肤中均有表达,生长旺盛时期(11月份)表达量最高(5.58±0.13),休止期(4月份)表达量最低(0.89±0.25),退行期(2月份)和生长旺盛前期(8月份)的表达量分别是(3.08±0.076),介于休止期(4月份)和生长旺盛(11月份)之间。4个时期间表达水平差异极显著(P0.01)。(2)免疫组化方法测定结果表明,β-catenin在辽宁绒山羊不同时期皮肤初、次级毛囊中均有表达,在初级毛囊毛母质,内、外根鞘都有表达;次级毛囊中β-catenin的表达部位在外根鞘,次级毛囊中β-catenin周期性表达变化与初级毛囊相同。11月份呈强表达,4月份表达最弱,8月份与2月份的表达介于11月与4月之间。(3)Western-blot检测结果表明,β-catenin蛋白表达在休止期(4月份)最低,表达量为0.64±0.024;退行期(2月份)和生长旺盛前期(8月份)表达量介于休止期(4月份)和生长旺盛期(11月份)之间;生长旺盛期(11月份)表达量最高,表达量为2.24±0.86,显著高于退行期(2月份)、休止期(2月份)和生长旺盛前期(11月份)(0.01P0.05)。(4)2-10 mmol·L-1LiCl组的毛囊β-catenin基因表达水平和生长长度极显著高于对照组(P0.01),毛囊形态维持良好;LiCl浓度为20mmol·L-1组的毛囊β-catenin基因表达量及生长长度极显著低于对照组(P0.01),体外培养毛囊生长受到抑制。结论:(1)绒毛的生长过程中,β-catenin基因、蛋白的表达呈周期性表达;当到生长旺盛期,表达最强,说明β-catenin的表达参与绒毛生长。(2)β-catenin蛋白在毛囊发育中表达部位主要在初级、次级毛囊的毛母质、毛乳头、内外根鞘。(3)添加促进剂,促使β-catenin基因表达水平提高;其中添加2-10 mmol·L-1的LiCl,诱导毛囊中β-catenin基因表达,促进毛囊的生长,高剂量导致毛囊生长受阻。本试验中5mmol·L-1为较优浓度。
[Abstract]:The expression of 尾 - catenin in the hair of cashmere goats was determined by immunohistochemistry and Western Blot . The results showed that : ( 1 ) The expression of 尾 - catenin was the lowest in the period of rest ( April ) and the growth period ( November ) . The expression of 尾 - catenin in hair follicles was significantly lower than that in the control group ( P0.01 ) . The expression of 尾 - catenin in hair follicles was significantly lower than that in the control group ( P0.01 ) .
【学位授予单位】:沈阳农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S827
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,本文编号:1994418
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