H7N9亚型AIV荧光定量RT-PCR技术建立及在活禽市场的应用

发布时间：2018-06-20 18:14

  本文选题：HN亚型流感病毒 + 荧光定量RT-PCR　； 参考：《中国兽医学报》2017年01期

【摘要】：针对H7N9亚型欧亚谱系AIV的血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因的序列保守区分别设计特异性引物和TaqMan探针。通过优化反应条件,建立了H7N9亚型禽流感病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法。利用该方法对泰安市活禽市场11个月的空气状况进行监测。结果显示:H7和N9基因的最低检测限度分别为100copies/μL和101 copies/μL,检测H7和N9基因的R2值均为0.999。批内和批间试验的变异系数均小于3%。采用该技术,活禽市场空气样品3/114份检测出H7N9阳性。结果表明:本试验建立的H7N9亚型AIV实时荧光定量RT-PCR方法与其他方法相比具有快速、特异和敏感的优点,可为H7N9亚型AIV的监测及早期诊断提供理论依据。
[Abstract]:Specific primers and TaqMan probes were designed for the sequence conserved regions of the H7N9 subtype Eurasian lineage AIV gene and the neuraminidase (NA) gene, respectively. By optimizing the reaction conditions, a real-time quantitative RT-PCR detection method for the H7N9 subtype avian influenza virus was established for 11 months in Tai'an live poultry market. The results showed that the minimum detection limits for H7 and N9 genes were 100copies/ L and 101 copies/ L respectively. The R2 values for the detection of H7 and N9 genes were both in 0.999. batch and in batch test, and the coefficient of variation was less than 3%.. Methods real time fluorescence quantitative AIV RT-PCR compared with the other method is rapid, sensitive and specific, which can provide the theoretical basis for the monitoring and early diagnosis of H7N9 subtype AIV.
【作者单位】： 山东农业大学动物科技学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31470258) 国家病原微生物重点实验室开放基金项目(SKLPBS1449) 国家环境保护环境微生物利用与安全控制重点实验室年开放基金资助项目(SMARC2013D001)
【分类号】：S855.3

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本文编号：2045234