六种隐孢子虫抗原的免疫保护效果研究

发布时间：2018-09-14 17:17

【摘要】：隐孢子虫(Cryptosporidium)是一种全球流行的重要人兽共患寄生原虫,具有广泛的宿主。隐孢子虫病目前是仅次于轮状病毒的第二大致腹泻疾病,每年有80万5岁以下儿童死于隐孢子虫引起的腹泻。尽管许多学者对其生物学特性、致病机理、免疫和基因组学等多个领域进行了研究,也取得了显著的成绩,但仍存在很多的问题和不足,隐孢子虫病至今尚无有效的治疗药物和疫苗。本研究对JVAP18S、Csp18S和CRU18S 3种隐孢子虫TaqMan实时荧光定量PCR方法的敏感性、特异性和重复性进行了比较。结果显示,3种方法均能有效检测隐孢子虫,其中JVAP18S法敏感性更高、特异性更强、重复性更好,适合于动物粪便中隐孢子虫卵囊的定量检测。ICR小鼠人工感染泰泽隐孢子虫后,第3 d开始排出卵囊,第9 d达高峰,21 d出现第二个高峰,至30 d仍有排出。构建了泰泽隐孢子虫子孢子表面抗原CP15基因的原核表达载体,实现了该基因的可溶表达,表达产物具有良好的免疫活性,其免疫血清与微小隐孢子虫抗原存在交叉反应。对rCP15、rCpSushi、rCP41制备的亚单位疫苗,以及pVAX-CpCTL10、pVAX-TH10和pVAX-CP15 3种核酸疫苗对ICR小鼠的免疫保护效果进行了比较。结果显示,6种疫苗均诱导产生了特异性的体液和细胞免疫反应,小鼠血清IgG抗体,IL-4、IL-17、INF-γ和TNF细胞因子,CD4+和CD8+淋巴细胞含量,以及脾淋巴细胞增值水平均有不同程度的提高。人工感染后各免疫组小鼠排卵囊量显著减少,其中pVAX-CpCTL10、rCP41和rCpSushi组减卵率分别达58.34%、53.78%和51.52%,表明6组疫苗免疫均对小鼠隐孢子虫感染有良好的保护效果。
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【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S855.9

【参考文献】

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本文编号：2243359