IGF-I和GSH对不同季节绵羊细管冻精质量的影响

发布时间：2018-10-07 18:22

【摘要】：绵羊是我国重要的经济动物,为人类提供所需的毛、肉等产品。目前,利用冻精进行人工授精、体外受精等手段可提高绵羊的繁殖效率,同时还可降低饲养成本。然而绵羊冻精,特别是非繁殖季节绵羊冻精质量较差,导致冻精的利用率较低。目前仍未找到适合绵羊精子生理特性的冷冻稀释液。为改善全季绵羊冷冻精液品质,本研究分别在繁殖季节(11月)及非繁殖季节(6月)对7只特克赛尔公羊进行采精,并将同季节不同个体精液混和。在冷冻稀释液中分别添加IGF-I和GSH,用一步稀释法制作细管冻精。精液解冻后,分别温育0、1及2 h,应用SYBR-14/PI荧光双染法、低渗肿胀实验和吖啶橙染色分别测定精子的顶体膜、质膜和DNA完整率。利用解冻精子进行体外受精、体外培养,并测定卵裂率和囊胚率。共同探索不同季节条件下对绵羊冷冻精子质量的影响,以及添加IGF-I和GSH对繁殖季节及非繁殖季节冻精质量的影响,为提高冻精利用效率提供理论依据。结果如下:1、不同季节(繁殖季节、非繁殖季节)对冷冻解冻后精子质量的影响:繁殖季节冷冻解冻后精子顶体膜、质膜的完整性以及体外受精后的卵裂率和囊胚率都显著高于非繁殖季节。2、在冷冻稀释液中添加不同浓度IGF-I(0、50、100、150、250 ng/mL)对繁殖季节冻精质量的影响:添加50、100、150 ng/m L IGF-I精子顶体膜完整率在解冻初期显著高于对照组(P0.05)。添加100 ng/m L IGF-I精子质膜及DNA完整率在解冻温育1 h时显著高于其对照组(P0.05),而添加150、250 ng/mL IGF-I显著降低精子顶体膜及质膜的完整率(P0.05)。因此在冷冻稀释液中添加100 ng/m L IGF-I可提高繁殖季节冷冻解冻后精子顶体膜、质膜、DNA的完整性。3、在冷冻稀释液中添加不同浓度IGF-I(0、50、100、150、250 ng/mL)对非繁殖季节冻精质量的影响:添加100 ng/mL IGF-I在初解冻、解冻后温育1及2 h时能显著提高精子顶体膜完整率(P0.05)。添加100、150 ng/m L IGF-I在初解冻及解冻后温育1 h时能显著提高精子质膜完整率(P0.05)。添加250 ng/mL IGF-I在解冻后温育1、2 h时显著降低精子DNA完整率(P0.05)。添加100、150 ng/m L IGF-I可提高非繁殖季节冻精解冻后体外受精的卵裂率。因此在冷冻稀释液中添加100 ng/m L IGF-I可提高非繁殖季节冷冻解冻后精子顶体膜、质膜的完整性,提高体外受精后的卵裂率。4、在冷冻稀释液中添加不同浓度GSH(0、1、2、2.5、3 m M)对繁殖季节冻精质量的影响:添加1 mM GSH在初解冻及解冻后温育1 h时能提高精子顶体膜完整率(P0.05)。添加1、2 mM GSH在初解冻及解冻后温育1、2 h时能显著提高精子质膜完整率(P0.05)。添加1 mM GSH在初解冻及解冻后温育1、2 h时能显著提高精子DNA完整率(P0.05)。因此在冷冻稀释液中添加1 mM GSH可提高繁殖季节冷冻解冻后精子顶体膜、质膜及DNA的完整性。5、在冷冻稀释液中添加不同浓度GSH(0、1、2、2.5、3 mM)对非繁殖季节冻精质量的影响:添加1 mM GSH在初解冻及解冻后温育1 h时能显著提高精子顶体膜完整率(P0.05)。添加1 mM GSH在解冻温育1 h时显著提高精子质膜完整率(P0.05)。在冷冻稀释液中添加1 mM GSH可提高非繁殖季节冻精解冻后体外受精的卵裂率及囊胚率。因此在冷冻稀释液中添加1 mM GSH可提高非繁殖季节冷冻解冻后精子顶体膜、质膜的完整性,提高体外受精后的卵裂率及囊胚率。综上所述,繁殖季节冷冻解冻后精子顶体膜、质膜完整性,及体外受精后的效果都好于非繁殖季节。在冷冻稀释液中添加IGF-I 100 ng/mL或GSH 1 mM对提高繁殖季节顶体膜及质膜完整性效果较好,同时也可改善非繁殖季节冷冻解冻后精子顶体膜、质膜的完整性以及体外受精后的效果。
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【学位授予单位】：新疆农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S826

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