新疆多浪羊pcDNA3.1-IL-1β表达载体的构建及鉴定

发布时间：2018-10-10 17:41

【摘要】：为了构建新疆多浪羊真核表达载体pc DNA3.1-IL-1β,试验采用重组质粒p MD-18TIL-1βPCR和质粒pc DNA3.1双酶切的方法,获得目的基因白细胞介素-1β(IL-1β)和载体片段pc DNA3.1(+),通过连接、转化宿主菌大肠杆菌DH5α感受态细胞,挑取阳性克隆,再通过菌液PCR和双酶切来验证阳性克隆,并测序。结果表明:试验已成功构建真核表达载体pc DNA3.1-IL-1β,完成了pc DNA3.1-IL-1β的菌液PCR和酶切鉴定。通过对IL-1β功能的了解,以及熟悉质粒提取和质粒连接的方法,完成重组质粒pc DNA3.1-IL-1β的构建。
[Abstract]:In order to construct the eukaryotic expression vector pc DNA3.1-IL-1 尾 of Xinjiang Dorang sheep, the recombinant plasmid p MD-18TIL-1 尾 PCR and plasmid pc DNA3.1 were digested to obtain the target gene interleukin-1 尾 (IL-1 尾) and the vector pc DNA3.1 (), by ligation. The positive clones were obtained by transforming the host bacteria into E. coli DH5 伪 competent cells, and the positive clones were confirmed by PCR and double enzyme digestion, and sequenced. The results showed that the eukaryotic expression vector pc DNA3.1-IL-1 尾 was successfully constructed, and the pc DNA3.1-IL-1 尾 was identified by PCR and enzyme digestion. The construction of recombinant plasmid pc DNA3.1-IL-1 尾 was completed by understanding the function of IL-1 尾 and being familiar with the methods of plasmid extraction and plasmid ligation.
【作者单位】： 塔里木大学生命科学学院;塔里木大学动物科学学院;塔里木畜牧科技兵团重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金项目(30960277) 研究生科研创新项目(TDGRI201520) 南疆地区羊标准化养殖的群发病防控及预警响应机制研究项目(TDZKCX201401)
【分类号】：S826;Q78

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本文编号：2262693