白牦牛、梅花鹿弓形虫和衣原体病的血清学调查及弓形虫基因分型研究

发布时间：2018-10-12 15:41

【摘要】：弓形虫病是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的一种具有广泛宿主的人畜共患原虫病,人和动物感染弓形虫后多为隐性感染,没有明显的临床症状。弓形虫病在世界范围内流行,并且感染率每年都有增加的趋势。弓形虫可以感染畜牧业中大多数畜禽,给养殖业带来重大的经济损失。衣原体病是由一种重要的专性寄生性病原体(chlamydia)引起的,此病原体具有广泛的宿主,能够感染人类、鸟类及哺乳动物。衣原体可以侵入呼吸道、肠道、泌尿生殖道以及中枢神经系统等,是一种重要的人兽共患病病原,不仅对畜牧业造成重大的经济损失,也对人类的身体健康造成严重的影响。本研究第一部分采用改良凝结试验(MAT)对天祝白牦牛和东北梅花鹿弓形虫病进行血清学调查。在天祝地区一共采集了974份白牦牛血清,经检测显示,天祝白牦牛弓形虫感染率为15.9%(155/974),此结果表明该地区白牦牛弓形虫感染率较高,加上有些藏民有食用生牦牛肉的习俗,从而导致了当地的藏民有感染弓形虫的风险。将白牦牛感染弓形虫相关因素经过逻辑回归分析,结果发现只有年龄是白牦牛感染弓形虫的主要风险因素,而白牦牛性别、胎次及采样季节在统计学上没有显著性不同(P0.05)。在东北地区一共采集了847份梅花鹿血清样品,包括哈尔滨的208份、长春的316份、吉林市的163份和赤峰的160份。检测结果显示梅花鹿感染弓形虫的总阳性率为13.5%,上述四个地区弓形虫感染率分别为12.0%、15.5%、12.3%和12.5%。对梅花鹿性别、地区及采样季节进行多重逻辑回归分析,结果显示只有采样季节与梅花鹿弓形虫感染率相关,属于风险因素。本实验结果也揭示了东北地区梅花鹿普遍感染弓形虫的情况,应该采取必要的措施预防和控制弓形虫病的蔓延。本研究第二部分采用间接血凝试验(IHA)方法对天祝白牦牛和东北梅花鹿衣原体病进行血清学调查。在天祝地区共采集了974份血清,经过检测显示,天祝白牦牛衣原体感染率高达16.2%(158/974)。地区、性别、年龄及季节因素经过逻辑回归分析,结果显示只有季节是影响白牦牛衣原体感染率的风险因素。白牦牛在春季、夏季、秋季和冬季的感染率分别为10.9%(24/220)、11.3%(26/231)、16.0%(40/250)和24.9%(68/273),且感染率都存在显著差异(P0.05)。这表明天祝白牦牛一年四季都有衣原体感染,应对该病进行全年防控。在东北地区共采集了847份梅花鹿血清样品,检测后结果显示梅花鹿衣原体感染率为9.5%,其中吉林、赤峰、长春和哈尔滨这四个地区梅花鹿衣原体感染率分别为6.13%、7.50%、7.91%及15.87%。通过逻辑回归分析,只有地区因素影响梅花鹿衣原体感染率,属于主要风险因素。这说明地区因素对梅花鹿衣原体感染率起到关键作用,因此需要因地制宜的采取有效措施来控制衣原体病的发生和蔓延。本研究第三部分采用半巢式PCR对414份天祝白牦牛组织DNA样品和长春的450份梅花鹿组织DNA样品进行了弓形虫B1基因检测。再通过PCR-RFLP方法来鉴定白牦牛和梅花鹿感染弓形虫的基因型。结果发现在白牦牛的样品中,有10份组织样品检测为弓形虫阳性,共分离到两个完整基因型虫株,都为ToxoDB#9型。在梅花鹿组织样品中,经过弓形虫B1基因检测,有17份DNA为阳性,经过PCR-RFLP方法分析后,发现有6株ToxoDB#9型弓形虫。本实验首次对我国白牦牛和梅花鹿弓形虫基因型进行报道,表明ToxoDB#9型弓形虫是流行于这两种动物的主要基因型。本研究采用MAT和IHA对天祝白牦牛和东北梅花鹿弓形虫病和衣原体病进行了血清学调查,并采用PCR-RFLP方法对我国天祝白牦牛和长春梅花鹿感染弓形虫的基因型进行了分析,并成功鉴定了我国优势基因型ToxoDB#9。实验结果不仅为这两种动物的弓形虫病及衣原体病的防控提供了基础数据,也为我国的弓形虫的宿主种类和基因型分布提供一定的参考数据。
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【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S858.23;S858.25

【参考文献】