仔猪大肠杆菌纤毛抗原反向间接血凝检测方法的建立与应用

发布时间：2018-11-11 15:16

【摘要】：为建立大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原的快速鉴别诊断和定量检测方法,用纯化的大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原免疫家兔制备阳性血清,其琼扩效价分别达到1∶32、1∶32、1∶128;利用该阳性血清IgG致敏醛化的绵羊红细胞,确定了最适K88、K99、987P阳性血清IgG的质量浓度分别为40、160、80μg/mL。用该方法对同一批次的K88、K99和987P纤毛抗原进行3次检测,K88、K99和987P纤毛样品的RIHA效价均为1∶1 600、1∶1 600和1∶800。结果表明,该检测方法具有较好的特异性和可重复性,可用于大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原的快速鉴别诊断。
[Abstract]:In order to establish a rapid method for differential diagnosis and quantitative detection of Escherichia coli K888-K99987P ciliated antigen, positive sera were prepared by immunizing rabbits with purified Escherichia coli K88- K99987P ciliated antigen. The agarose expansion titers of K888-K99987P ciliated antigen were 1: 32, 1: 32, 12: 8, respectively. Using the positive serum IgG to sensitize the sheep erythrocytes, the optimal mass concentration of K88G K99987P positive serum IgG was determined to be 400.160 渭 g / mL, respectively. The results showed that the RIHA titers of the same batch of Cilium antigens K888-K99 and 987P were 1:1 600: 1 600 and 1: 800 respectively, and the RIHA titers of the same batches of K88N K99 and 987P cilia were 1: 1 600 and 1: 800, respectively. The results showed that the method had good specificity and reproducibility, and could be used for rapid differential diagnosis of Escherichia coli K88K99987P ciliated antigen.
【作者单位】： 农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/湖北省农业科学院畜牧兽医研究所;
【基金】：湖北省农业科技创新中心项目(2011-620-001-003) 湖北省科技支撑计划项目(2014BBB010) 湖北省自然科学基金(重点)项目(2014CFA106) 湖北省技术创新专项重大项目(2016ABA124)
【分类号】：S858.28

【参考文献】

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1 熊媛媛;黄涛;郑佳;漆世华;谢红玲;吴玉石;;大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原提纯及抗血清制备[J];中国兽药杂志;2012年12期

2 陆桂平,华荣虹,张书霞,何孔旺;检测K88~+肠毒素性大肠杆菌PCR方法的建立[J];畜牧与兽医;2002年12期

3 J.M.Fairbrother;汪铭书;;从腹泻病新生仔猪分离的非传统血清型E.coli的纤毛抗原和肠毒素检测[J];国外兽医学-畜禽传染病;1989年03期

【共引文献】

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1 王方;彭俊杰;王业大;刘学芹;;鲤春病毒血症病毒核蛋白原核表达及单克隆抗体制备[J];华中农业大学学报;2017年03期

2 卢渊;;白茅根治疗肾综合征出血热急性肾功能衰竭效果分析[J];光明中医;2017年09期

3 徐璇;董静;白娟;王先炜;姜平;;两株抗猪伪狂犬病毒的单克隆抗体制备与鉴定[J];畜牧与兽医;2017年05期

4 周渝阳;李秉首;李芝蓉;何艳艳;沈桂林;叶丽林;;淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒GP2单克隆抗体的制备和鉴定[J];免疫学杂志;2017年04期

5 徐立蒲;王小亮;张文;潘勇;景宏丽;王静波;王姝;曹欢;王澎;那立海;江育林;;养殖锦鲤鲤鱼浮肿病的检测与鉴定[J];中国畜牧兽医;2017年02期

6 于力;王津津;卢奕良;郑晓聪;贾鹏;何俊强;史秀杰;刘莹;刘荭;;鲤春病毒血症病毒核酸适配体的筛选及分析[J];中国动物检疫;2017年02期

7 彭俊杰;张琪;贾路路;林蠡;袁军法;曾令兵;周勇;刘学芹;;鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2) ORF25蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备[J];华中农业大学学报;2017年02期

8 刘欢;金红岩;侯强;史秋梅;董瑞凯;张通明;沈萍;侯绍华;;抗犬细小病毒单链抗体的制备[J];中国兽医科学;2016年08期

9 胡景炎;王秋霞;刘滔涛;陈欢利;涂宜强;金俊杰;白宇;;猪传染性胃肠炎病毒M蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J];黑龙江畜牧兽医;2016年13期

10 杨敏;魏京广;李鹏飞;魏世娜;黄友华;秦启伟;;石斑鱼(Epinephelus coioides)MHC基因多态性及其与虹彩病毒抗性的关联分析(英文)[J];Science Bulletin;2016年09期

【二级参考文献】

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1 尚杰;耿增超;陈心想;张雯;赵军;王森;王亚萍;;生物炭对土壤酶活性和糜子产量的影响[J];干旱地区农业研究;2015年02期

2 宋延静;张晓黎;龚骏;;添加生物质炭对滨海盐碱土固氮菌丰度及群落结构的影响[J];生态学杂志;2014年08期

3 齐瑞鹏;张磊;颜永毫;文曼;郑纪勇;;定容重条件下生物炭对半干旱区土壤水分入渗特征的影响[J];应用生态学报;2014年08期

4 陈温福;张伟明;孟军;;生物炭与农业环境研究回顾与展望[J];农业环境科学学报;2014年05期

5 唐行灿;张民;;生物炭修复污染土壤的研究进展[J];环境科学导刊;2014年01期

6 张玉兰;陈利军;段争虎;武志杰;孙彩霞;王俊宇;;荧光光谱法测定生物炭/秸秆输入土壤后酶活性的变化[J];光谱学与光谱分析;2014年02期

7 武玉;徐刚;吕迎春;邵宏波;;生物炭对土壤理化性质影响的研究进展[J];地球科学进展;2014年01期

8 陈心想;何绪生;张雯;耿增超;;生物炭用量对模拟土柱氮素淋失和田间土壤水分参数的影响[J];干旱地区农业研究;2014年01期

9 丁艳丽;刘杰;王莹莹;;生物炭对农田土壤微生物生态的影响研究进展[J];应用生态学报;2013年11期

10 宋长青;吴金水;陆雅海;沈其荣;贺纪正;黄巧云;贾仲君;冷疏影;朱永官;;中国土壤微生物学研究10年回顾[J];地球科学进展;2013年10期

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2 范书才,郭景煜;犊牛腹泻大肠杆菌二种新纤毛抗原菌株的分析鉴定[J];中国兽医杂志;1988年12期

3 朱良全;李虹;范书才;;大肠杆菌K_(99)纤毛抗原的提纯和抗血清制备[J];中国兽医杂志;2009年05期

4 陈慧珠;董雯;刘智宏;;含F41抗原E.coli菌株的质粒检测[J];兽医药品通讯;1988年03期

5 毕丁仁,杜松枝,陈毓川,郭定宗,叶培根;仔猪大肠杆菌纤毛抗原调查[J];中国兽医科技;1988年04期

6 吴章才;章光华;郦光初;;肠可净推广前景暨肠可净推广试验报告[J];中国畜禽种业;2009年11期

7 周其志,苏荣扎布,杨立宏;E.coli纤毛抗原K_(99)菌株电子显微镜观察试验[J];动物检疫;1990年02期

8 熊媛媛;黄涛;郑佳;漆世华;谢红玲;吴玉石;;大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原提纯及抗血清制备[J];中国兽药杂志;2012年12期

9 刘智宏;陈慧珠;赵轶先;;用菌落原位免疫酶联法测定大肠杆菌F41纤毛抗原[J];中国兽药杂志;1993年03期

10 邝明慧,李淑霞,呼西旦,吴铭齐;大肠杆菌K88ac、K99和987P纤毛抗原的纯化及抗血清的制备[J];畜牧兽医学报;1989年S1期

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本文编号：2325253