羊泰勒虫荧光定量PCR检测方法的建立

发布时间：2018-11-24 20:35

【摘要】：为建立一种敏感、快速的羊泰勒虫检测方法,本研究根据GenBank中登录的羊泰勒虫18S rRNA保守区设计1对特异引物,经各反应条件的优化,建立了羊泰勒虫荧光定量PCR检测方法。结果显示该方法可以特异地检测羊泰勒虫,而对卵形巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、羊巴贝斯虫和瑟氏泰勒虫检测均为阴性;该方法的灵敏度可达2.08×10~1拷贝/μL,比普通PCR灵敏度高100倍。组内及组间重复试验变异系数均小于5%。对50份临床样品进行检测,荧光定量PCR和常规PCR的阳性检出率分别为48%和38%。本实验建立的荧光定量PCR检测方法适用于羊泰勒虫定量分析和分子流行病学调查。
[Abstract]:In order to establish a sensitive and rapid detection method for Taylor's worm, a pair of specific primers were designed according to the 18s rRNA conservative region registered in GenBank, and a fluorescent quantitative PCR method was established for the detection of Taylor's sheep by optimizing the reaction conditions. The results showed that the method could be used to detect Taylor's worm specifically, but negative for Babes ovale, Babes double bud, Babes sheep and Taylor serovar. The sensitivity of this method can reach 2.08 脳 10 ~ (-1) copy / 渭 L, which is 100 times higher than that of ordinary PCR. The coefficient of variation of repeated tests within and between groups was less than 5. The positive rates of fluorescence quantitative PCR and routine PCR were 48% and 38% respectively. The fluorescent quantitative PCR method developed in this study is suitable for quantitative analysis and molecular epidemiological investigation of Taylor's insect in sheep.
【作者单位】： 吉林农业科技学院动物科技学院;预防兽医学吉林省重点实验室;延边大学农学院;
【基金】：吉林省科技发展计划项目(20150623004TC) 吉林省重点学科培育项目(吉农院合字[2015]第x030号) 吉林农业科技学院种子基金项目(吉农院合字[2014]第Z07号)
【分类号】：S852.7

【参考文献】

相关期刊论文 前7条

1 杨菊凤;田慧丽;郭瑞萍;张兴国;徐相亭;;山东省媒介蜱类种类鉴定及羊泰勒虫病流行病学调查[J];中国兽医学报;2015年06期

2 李佳;张杨;王振宝;李永畅;巴音查汗;;马泰勒虫荧光定量PCR检测方法的建立[J];中国预防兽医学报;2014年09期

3 郭庆勇;王振宝;何晓杰;曹雯丽;巴音查汗;;牛环形泰勒虫病实时荧光PCR诊断方法的建立及初步应用[J];中国兽医学报;2013年09期

4 袁延庆;李有全;刘志杰;杨吉飞;陈泽;关贵全;罗建勋;殷宏;;我国南方地区羊泰勒虫病的流行病学调查[J];中国兽医科学;2013年06期

5 孟林明;李有全;何海宁;李志;刘志杰;陈泽;杨吉飞;关贵全;牛庆丽;罗建勋;殷宏;余四九;;甘肃河西四地市羊泰勒虫病的流行病学调查[J];中国兽医科学;2012年11期

6 李有全;彭欲率;刘志杰;关贵全;杨吉飞;陈泽;牛庆丽;罗建勋;殷宏;;中国部分地区羊泰勒虫病的流行病学调查及分类鉴定[J];中国农业科学;2012年16期

7 张宝;李有全;罗建勋;殷宏;;我国羊泰勒虫病及其基因工程疫苗研究进展[J];动物医学进展;2009年03期

【共引文献】

相关期刊论文 前10条

1 田万年;薛书江;贾立军;张守发;;卵形巴贝斯虫荧光定量PCR方法的建立及初步应用[J];中国兽医科学;2017年05期

2 田万年;李国江;薛书江;贾立军;张守发;;羊泰勒虫荧光定量PCR检测方法的建立[J];中国预防兽医学报;2017年05期

3 陈千林;刘梦丽;许正茂;王振宝;吉尔格力;史亚明;巴音查汗;;检测牛感染犬新孢子虫的TaqMan-MGB Real-time PCR方法的建立[J];中国农业大学学报;2016年12期

4 李佳;段真真;白正辉;王新丽;何宗霖;巴音查汗;;阿克苏地区羊感染泰勒虫病流行病学调查及分类鉴定[J];黑龙江畜牧兽医;2016年21期

5 黄忠武;刘强;赵爱云;陶大勇;;新疆库车县绵羊的泰勒虫感染情况调查[J];草食家畜;2016年06期

6 呼尔查;哈西巴特;李永畅;席耐;巴音查汗;;新疆和静县部分地区散养户焉耆马梨形虫病的PCR诊断[J];中国兽医杂志;2016年10期

7 李佳;侯芳;段真真;巴音查汗;何宗霖;;羊梅迪-维斯那病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立[J];动物医学进展;2016年10期

8 陈千林;刘梦丽;许正茂;王振宝;曹政;赵扬扬;巴音查汗;;弓形虫TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立[J];中国预防兽医学报;2016年09期

9 图尔荪·萨迪尔;李佳;王振宝;宋瑞其;巴音查汗;;新疆昭苏县马梨形虫的检测及传播媒介蜱的鉴定[J];动物医学进展;2016年07期

10 秦鸽鸽;韩元;李有全;殷宏;罗建勋;蔡葵蒸;;与吕氏泰勒虫TlSP蛋白互作的绵羊淋巴细胞蛋白酵母双杂交系统的筛选[J];中国兽医科学;2016年01期

【二级参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 袁延庆;李有全;刘志杰;杨吉飞;陈泽;关贵全;罗建勋;殷宏;;我国南方地区羊泰勒虫病的流行病学调查[J];中国兽医科学;2013年06期

2 刘启生;王振宝;王真;哈森;张玉婷;巴音查汗;;牛巴贝斯虫实时荧光PCR检测方法的建立[J];中国预防兽医学报;2013年01期

3 孟林明;李有全;何海宁;李志;刘志杰;陈泽;杨吉飞;关贵全;牛庆丽;罗建勋;殷宏;余四九;;甘肃河西四地市羊泰勒虫病的流行病学调查[J];中国兽医科学;2012年11期

4 李有全;彭欲率;刘志杰;关贵全;杨吉飞;陈泽;牛庆丽;罗建勋;殷宏;;中国部分地区羊泰勒虫病的流行病学调查及分类鉴定[J];中国农业科学;2012年16期

5 王振宝;刘启生;哈森;何晓杰;刘绪斌;孟茹;叶尔保勒;巴音查汗;;牛环形泰勒虫病二温式PCR诊断方法的建立及初步应用[J];动物医学进展;2012年05期

6 曹雯丽;陈亮;刘启生;巴音查汗;;新疆牛环形泰勒虫病的流行现状和防治[J];草食家畜;2011年03期

7 吴志仓;;甘肃省永靖县羊泰勒虫病流行病学调查[J];畜牧与兽医;2011年02期

8 赵祥平;王玉玲;侯艳梅;;驽巴贝斯虫病巢式PCR检测方法的研究[J];中国动物检疫;2009年10期

9 田万年;贾立军;丁德;薛书江;张守发;宫江;;吉林省珲春地区羊泰勒虫病流行病学调查[J];畜牧与兽医;2008年03期

10 郭淑珍;马登录;牟永娟;杨树猛;王文飙;格桂花;尕旦吉;方百乾;赵春生;;甘南地区羊泰勒虫病的预防与治疗试验[J];中国兽医寄生虫病;2006年03期

，

本文编号：2354965