不同条件保存卵巢对小鼠GV期卵母细胞染色质构型及组蛋白表观修饰的影响

发布时间：2019-01-02 15:54

【摘要】：研究表明,在成熟前NSN构型的卵母细胞要转变成SN构型,且SN型卵母细胞比NSN型卵母细胞发育能力强,但其机理尚不清楚。并且GV期卵母细胞核心组蛋白修饰变化的研究结果与染色质构型转变和基因活动变化相矛盾。因此,进一步研究GV期卵母细胞染色质构型转变的调控机制及其与组蛋白表观修饰和发育能力的关系,对于了解卵母细胞成熟机理、改善成熟质量和提高发育能力具有重要意义。我们以18-19日龄的雌性小鼠为动物模型,摘除卵巢后在体外37℃和39℃分别各保存1h和2h,使染色质构型与相关组蛋白修饰和发育能力进行脱钩,进一步研究体外保存卵巢对小鼠GV期卵母细胞染色质构型、卵母细胞发育能力以及组蛋白表观修饰(乙酰化、甲基化、磷酸化)的影响。研究结果表明：(1)体外保存卵巢以后卵母细胞染色质凝集程度加重,且异常染色质构型增多；(2)37℃保存1h后,卵母细胞发育能力为五组中最高。相同温度下保存,随保存时间延长,发育能力下降；保存相同时间,温度越高,发育能力越差；(3)同一温度下随保存时间延长,组蛋白(H3K14、H4K12、H4K16)乙酰化水平、组蛋白(H3K4、H3K9)甲基化水平以及组蛋白磷酸化水平(H3S10)逐渐下降,与发育能力变化趋势一致；保存相同时间,温度越高各种组蛋白表观修饰水平越低,与卵母细胞发育能力变化趋势一致；(4)随保存温度的升高和保存时间的延长,颗粒细胞凋亡程度加重,FasL表达水平相应升高；(5)随保存温度的升高和保存时间的延长,卵母细胞Fas表达水平相应升高。由上述结果我们可以知道体外不同条件保存卵巢以后卵母细胞染色质凝集现象加重,异常染色质构型增多；体外不同条件保存卵巢以后卵母细胞发育能力下降,且发育能力与组蛋白表观修饰水平趋势一致；体外不同条件保存卵巢过程中,在颗粒细胞与卵母细胞之间Fas/FasL信号通路起到了一定的作用,Fas/FasL蛋白少量表达促进卵母细胞发育,大量表达抑制卵母细胞发育；另外,颗粒细胞轻度凋亡促进卵母细胞发育,重度凋亡抑制卵母细胞发育。
[Abstract]:The results showed that the oocytes with NSN configuration should be transformed into SN configuration before maturation, and SN oocytes had stronger developmental ability than NSN oocytes, but its mechanism was not clear. The results of GV oocyte core histone modification were inconsistent with chromatin configuration and gene activity. Therefore, further study on the regulatory mechanism of chromatin configuration transformation in GV oocytes and its relationship with histone apparent modification and developmental ability is helpful to understand the mechanism of oocyte maturation. It is important to improve maturation quality and development ability. The female mice aged 18-19 days were used as animal models. After ovariectomized, they were preserved at 37 鈩，

本文编号：2398695