【摘要】：中草药具有营养和药用双重作用,且药物残留低,因此研究中草药对反刍动物日粮营养的调控具有重要的理论和实际意义。本课题自拟复方中药“壮牛灵1、2、3”、“育肥散1、2、3”以及抗热应激复方,以瘤胃素为参照,以空白为对照,选择36头安装有永久性瘤胃瘘管山羊,采用随机单位平均分组设计,结合传统手段和分子生物学方法研究其对山羊瘤胃发酵和细菌菌群的影响,探讨复方中药对山羊瘤胃发酵特性的调控作用。复方中药对山羊瘤胃发酵的影响采集第20-22日饲喂前Oh和饲喂后2h、4h、6h、8h、10h、12h共计7个时间点的瘤胃液,研究复方中药对山羊瘤胃pH、氨氮(NH3-N)浓度、微生物蛋白(MCP)含量以及挥发性脂肪酸(VFA)浓度的影响。结果发现：不同复方中药对瘤胃液pH值的影响范围为6.22-6.91,各组影响差异不显著(P0.05),但不同复方中药组pH均值明显升高；7种复方中药对NH3-N浓度的影响差异不显著(P0.05),“育肥散2”组瘤胃内MCP含量显著升高(P0.05),“壮牛灵1”组MCP含量显著最低(P0.05)；“育肥散2”组总挥发性脂肪酸显著高于瘤胃素组(P0.05),其他处理组TVFA含量降低,差异不显著(P0.05)；“育肥散2”组乙酸显著高于瘤胃素(P0.05)；除“育肥散2”组外,瘤胃素组丙酸显著高于其他各组(P0.05),“育肥散2”组丙酸含量升高；“育肥散2”、抗热应激与“壮牛灵3”组丁酸含量显著升高(P0.05),瘤胃素组丁酸含量显著低于其他各组(P0.05)；瘤胃素组乙丙比显著降低(P0.05),“育肥散1”和抗热应激组显著升高(P0.05)。结论：所有复方中药均能延缓山羊瘤胃内pH下降,复方中药“育肥散2”显著增加瘤胃内MCP含量,乙酸和丁酸产量增加；其他复方中药处理组瘤胃乙酸产量降低,从而使降低VFA浓度,其中“壮牛灵1”和“壮牛灵2”效果较优。二、复方中药对山羊瘤胃细菌菌群的影响提取第20、21、22日晨饲前Oh瘤胃液细菌DNA,每头羊不同采集时间的DNA等量混合,利用细菌16SrDNA V4区序列为引物进行PCR扩增,采用Illumina Miseq PE300测序,进行物种注释及丰度分析,进一步α和β多样性分析。结果发现：36个样品共得到1,445,331条tags,大约有81%的原始reads通过了所有质量控制,OTU分析显示样品Total tags中能够被注释到物种的Taxon Tags丰富,各样品中相似性没有到达97%的OTUs序列大于最终获得的OTUs数目。物种注释显示在不同的分类水平下,除“壮牛灵2”以外,瘤胃素组所获得的OTUs丰度显著多于其他组(P0.05),“壮牛灵3”分类在各级别的OTUs主度显著降低(P0.05)。样品复杂度分析发现,空白组与“育肥散1”、“育肥散2”组的样品物种OTU饱和曲线、Chaol曲线和香农指数较高,其秩多度曲线丰富度和均匀度较高,而瘤胃素、“壮牛灵1”、“壮牛灵3”以及“育肥散3”组样品物种OTU饱和曲线、Chaol曲线和香农指数低,秩多度曲线其丰富度和均匀度较低。基于门分类水平上,将所有的序列鉴定为11个门,其中拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria)和硬壁菌门(Firmicutes)为所有样品优势菌门,“壮牛灵1”、“壮牛灵3”、抗热应激以及瘤胃素组中硬壁菌门相对丰度显著降低(P0.05),此外,瘤胃素组中变形菌门相对丰度显著升高(P0.05)。根据相对丰度排在前10的属进行物种注释,普雷沃氏菌属(Prevotella)为各样品中优势菌属,琥珀酸弧菌属(Succinivibrio)在抗热应激和瘤胃素组中比例较高,待定属TG5在“壮牛灵1”中比例较高。PCoA分析发现纳入本研究的36个山羊瘤胃菌群呈现连续分布的特点,同一处理“壮牛灵1”、“壮牛灵2”、“育肥散3”、抗热应激、瘤胃素组样品有聚类趋势,‘壮牛灵1”与“壮牛灵2”样品有明显交叠现象。结论：除“育肥散1”、“育肥散2”外,其他复方中药瘤胃菌群群落多样性显著降低,其中“壮牛灵3”瘤胃菌群群落丰度显著降低,所有样品中变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、硬壁菌门(Firmicutes)为优势菌门,“壮牛灵1”、“壮牛灵3”、抗热应激对瘤胃菌群中硬壁菌门的相对丰度显著降低,普雷沃氏菌属(Prevotella)为36例样品瘤胃菌群中的优势菌属。三、复方中药山羊瘤胃纤维降解菌数量的影响提取第20,21和22日早晨饲喂前(0h)瘤胃液细菌DNA,应用Real-time PCR对产琥珀酸丝状杆菌、黄色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌进行绝对定量。结果发现：“壮牛灵1”与“育肥散2”组对白色瘤胃球菌数量的影响不显著(P0.05),其他复方中药组在白色瘤胃球菌的数量显著降低(P0.05)；除瘤胃素组外,“育肥散2”组中黄色瘤胃球菌数量显著高于其他各组(P0.05)；瘤胃素组中产琥珀酸丝状杆菌数量显著升高(P0.05),复方中药组差异不显著(P0.05)。结论：“壮牛灵1”和“育肥散2”对白色瘤胃球菌数量无显著影响,“育肥散2”显著促进黄色瘤胃球菌的生长。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：西南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S853.7
【参考文献】
相关期刊论文 前10条
1 李旦;王加启;卜登攀;杨舒黎;魏宏阳;周凌云;;运用Real-time PCR方法研究日粮添加豆油与胡麻油对肉牛瘤胃纤维分解菌数量的影响[J];动物营养学报;2008年03期
2 安娟;赵晓川;;反刍动物甲烷排放机制及其调控[J];饲料工业;2006年13期
3 李大彪;张梅梅;于永强;李红磊;塔娜;邢媛媛;王卫云;;单宁和聚乙二醇对绵羊和山羊瘤胃纤维降解菌数量的影响[J];动物营养学报;2015年02期
4 秦为琳;应用气相色谱测定瘤胃挥发性脂肪酸方法的研究改进[J];南京农业大学学报;1982年04期
5 冯宗慈;高民;;通过比色测定瘤胃液氨氮含量方法的改进[J];内蒙古畜牧科学;1993年04期
6 刘庆华;刘长桃;林欣;陈思恋;;复方中草药添加剂对南江黄羊瘤胃代谢和细菌数量的影响[J];经济动物学报;2013年02期
7 吴森;张莺莺;昝林森;;基于高通量测序的宏基因组学技术在动物胃肠道微生物方面的研究进展[J];生物技术进展;2015年02期
8 汪水平;王文娟;谭支良;;反刍动物体内氨与尿素代谢研究进展[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2009年02期
9 汪水平;王文娟;左福元;周沛;赵建军;张家骅;;中药复方对夏季肉牛的影响:Ⅱ.血气指标、血清代谢产物浓度及免疫和抗氧化功能参数[J];畜牧兽医学报;2011年05期
10 赵国琦;贾亚红;陈小连;孙龙生;;不同NDF/NFE比的日粮对山羊瘤胃发酵参数影响的研究[J];中国畜牧杂志;2006年13期
相关博士学位论文 前5条
1 王新峰;绞股蓝皂甙对山羊瘤胃菌群及微生物发酵特性和甲烷产量的影响[D];南京农业大学;2009年
2 齐智利;玉米的不同加工处理对泌乳奶牛瘤胃发酵和小肠消化以及能氮同步代谢影响的研究[D];内蒙古农业大学;2004年
3 刘大程;不同品质粗饲料日粮及添加酵母培养物对绵羊瘤胃发酵及纤维分解菌的影响[D];内蒙古农业大学;2007年
4 李亚丹;芒草驯养湘西黄牛（Bos taurus）瘤胃微生物多样性及β-葡萄糖苷酶新基因的克隆与表达研究[D];湖南农业大学;2012年
5 郑会超;加减白虎汤散剂缓解奶牛热应激的效果及其机理研究[D];浙江大学;2013年
相关硕士学位论文 前2条
1 徐岩;女贞子提取物对绵羊瘤胃发酵及日粮养分消化影响的研究[D];东北农业大学;2007年
2 吕惠敏;复方中草药有效成分的分析及对兔肠道功能的影响[D];福建农林大学;2012年
，
本文编号：
2430245
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/2430245.html
