猪流行性腹泻病毒间接ELISA检测方法的建立

发布时间：2019-05-14 18:20

【摘要】：为建立快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的血清学方法,本研究以原核表达的猪流行性腹泻病毒AH2012株N蛋白为包被抗原,通过条件优化建立了一种快速的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。利用该ELISA检测猪流行性腹泻病毒血清时为阳性,而与猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、口蹄疫病毒,猪圆环病毒2型、猪呼吸道冠状病毒的阳性血清均无交叉反应;批内和批间重复性试验的变异系数均小于5.55%;该方法与中和试验检测结果总符合率为88.75%。本研究建立的方法可以应用于我国猪流行性腹泻病毒的诊断、流行病监测以及疫苗研发时抗体水平的检测,为该病的防控提供一种有效的检测工具。
[Abstract]:In order to establish a serological method for rapid detection of Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV), the N protein of Porcine epidemic diarrhea virus (AH2012) strain expressed in prokaryotic was used as coating antigen. A rapid (ELISA) detection method for indirect enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa) was established by optimizing the conditions. The ELISA was positive for the detection of Porcine epidemic diarrhea virus, but was associated with Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus, pseudorabies virus, Porcine Infectious gastroenteritis virus, foot-and-mouth Disease virus and Porcine circovirus Type 2. There was no cross reaction in the positive serum of swine respiratory coronavirus. The coefficient of variation of intra-assay and inter-assay repeatability test was less than 5.55%, and the total coincidence rate between this method and neutralization test was 88.75%. The method established in this study can be applied to the diagnosis, epidemiological surveillance and antibody level detection of swine epidemic diarrhea virus in China, and provides an effective detection tool for the prevention and control of the disease.
【作者单位】： 江苏省农业科学院兽医研究所;西藏农牧学院动物科学学院;河北农业大学动物医学院;
【基金】：江苏省农业科技自主创新基金项目[CX(15)1056]
【分类号】：S852.651

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本文编号：2476939