鸡巨噬细胞HD11不同转染方法的比较分析

发布时间：2019-06-27 19:37

【摘要】：以鸡巨噬细胞HD11作为研究对象,分别采用5种不同的脂质体试剂转染和电转方法将含有绿色荧光蛋白(GFP)的质粒转入HD11细胞中,然后通过比较并筛选出适合鸡巨噬细胞HD11的最佳转染方法。结果显示:Lipofectamine 2000 Reagent、Attractene Transfection Reagent和Trans IT湟-2020 Transfection Reagent几种常见的脂质体转染试剂并不适用于HD11细胞转染。而Coming Transfection Reagent、Lip2000 Transfection Reagent脂质体转染试剂和电转可用于HD11细胞转染;其中,Lip2000 Transfection Reagent转染试剂效果最好。在此基础上,通过进一步优化得出:当DNA(μg)和Lip2000(μL)的比例为1∶1.5时转染效率最高。本研究成功筛选出一种有效的鸡巨噬细胞HD11转染方法,为鸡巨噬细胞的转染及其相关研究提供了实验依据。
[Abstract]:Chicken macrophage HD11 was used as the research object. The plasmid containing green fluorescent protein (GFP) was transferred into HD11 cells by five different Liposome reagents and electrotransfer methods, and then the best method of HD11 transfer suitable for chicken macrophage HD11 was selected by comparison and screening. The results showed that Lipofectamine 2000 Reagent,Attractene Transfection Reagent and Trans IT Huang-2020 Transfection Reagent were not suitable for HD11 cell transfer. Coming Transfection Reagent,Lip2000 Transfection Reagent liposomes and electrotransfer can be used in HD11 cells, among which Lip2000 Transfection Reagent has the best effect. On this basis, it is concluded that when the ratio of DNA (渭 g) to Lip2000 (渭 L) is 1: 1.5, the transfer efficiency is the highest. In this study, an effective method of HD11 transfer of chicken macrophages was successfully screened, which provided an experimental basis for the transfer of chicken macrophages and its related research.
【作者单位】： 扬州大学表观遗传学及表观基因组学研究所;扬州大学动物科学和技术学院;扬州大学医学院;
【基金】：国家自然科学基金重大研究计划(91540117);国家自然科学基金面上项目(81372237);国家自然科学基金青年基金项目(31602032) 江苏省畜牧学优势学科项目
【分类号】：S852.4

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本文编号：2507089