甲流重组犬流感病毒的小鼠致病性研究

发布时间：2019-09-02 06:36

【摘要】：本研究通过建立犬流感病毒(Canine influenza virus,CIV)感染BALB/c小鼠模型,探索新发现的甲流重组CIVs对小鼠的致病性。我们采用9株H1N1和1株H3N2甲流重组CIVs,以106 TCID_(50)/mL的剂量滴鼻攻毒10组小鼠。结果表明:感染后4 d小鼠体重均有一定程度的下降,其中A/Canine/Guangxi/LZ56/2015(H1N1)(简称LZ56)组的小鼠体重下降最为明显(P0.5),其存活率为77.78%;通过TCID_(50)测定发现10株甲流重组CIVs均能在小鼠的鼻窦和肺脏复制,以LZ56组的复制滴度最高,分别达到107.3 TCID_(50)/mL和10~(5.3) TCID_(50)/mL;肺脏病理切片观察发现LZ36、LZ45、LZ56和QZ5组出现不同程度病变,以支气管上皮细胞坏死脱落,肺泡壁增厚,肺泡腔以及支气管内有大量的弥漫性浸润的单核细胞为主要特征。结果表明,新型重组CIVs均能感染BALB/c小鼠,并能在小鼠体内较好复制,甚至致死,一旦这些新型CIVs以犬为中间宿主传播给人,势必对人类健康构成重大威胁。因此,加强对CIVs的监测将为防控人流感大暴发提供提前预警。
【图文】：

·34·中国动物传染病学报2017年12月LZ36LZ20LZ52LZ45LZ56QZ5WZ1WZ2LZ317NNTW15Control01234567891011121314重体%)(时间(d)1201101009080图1小鼠体重变化图Fig.1BodyweightofthemiceinfectedwithdifferentCIVs2.2攻毒后小鼠存活率通过14d的体重监测，结果只有LZ56组的重组H1N1亚型毒株均在攻毒后6d和攻毒后7d致死小鼠，其存活率为77.78%，其他组的毒株均未能致死小鼠，其存活率为100%（图2）。2.3小鼠攻毒后病毒在呼吸道的复制情况采用TCID50方法，对10组小鼠各个脏器中病毒进行滴定，我们发现这些重组病毒均能在肺脏和上鼻窦复制，平均病毒滴度≥103.7TCID50/mL，其中LZ56组在肺脏的复制能力较好，感染后3d和5d分别达到106.0TCID50/mL和106.1TCID50/mL。此外LZ45组相比其他组的肺脏复制较差，感染后5d的病毒滴度仅有103.7TCID50/mL。相对应的是，上鼻窦病毒滴度分别为104.5TCID50/mL和104.9TCID50/mL。结果表明这些重组H1N1和H3N2亚型CIVs能较好地适应在哺乳动物体内的复制，甚至具有潜在的传播能力（图3）。2.4小鼠肺脏病理变化我们采用HE染色观察小鼠肺脏损伤程度，结果发现所有CIVs重组病毒都可以造成肺脏不同程度的病变，其中以LZ36、LZ45、QZ5和LZ56组小鼠肺脏损伤较为严重，主要以支气管坏死脱落、肺泡壁增厚、肺泡腔以及支气管内有大量的弥漫性浸润的单核细胞为主。对照组肺泡均匀，无萎缩或扩张，无充血或炎细胞浸润（HE染色-蓝紫色，图中黑色箭头所指）、巨噬细胞（HE染色-红色，图中蓝色箭头所指），见图4。毒株Strains简称Abbreviation基因片段GenesegmentsPB2PB1PAHANPNAMNSA/Canine/Guangxi/LZ317/2013(

·34·中国动物传染病学报2017年12月LZ36LZ20LZ52LZ45LZ56QZ5WZ1WZ2LZ317NNTW15Control01234567891011121314重体%)(时间(d)1201101009080图1小鼠体重变化图Fig.1BodyweightofthemiceinfectedwithdifferentCIVs2.2攻毒后小鼠存活率通过14d的体重监测，结果只有LZ56组的重组H1N1亚型毒株均在攻毒后6d和攻毒后7d致死小鼠，其存活率为77.78%，其他组的毒株均未能致死小鼠，其存活率为100%（图2）。2.3小鼠攻毒后病毒在呼吸道的复制情况采用TCID50方法，对10组小鼠各个脏器中病毒进行滴定，我们发现这些重组病毒均能在肺脏和上鼻窦复制，平均病毒滴度≥103.7TCID50/mL，其中LZ56组在肺脏的复制能力较好，感染后3d和5d分别达到106.0TCID50/mL和106.1TCID50/mL。此外LZ45组相比其他组的肺脏复制较差，感染后5d的病毒滴度仅有103.7TCID50/mL。相对应的是，，上鼻窦病毒滴度分别为104.5TCID50/mL和104.9TCID50/mL。结果表明这些重组H1N1和H3N2亚型CIVs能较好地适应在哺乳动物体内的复制，甚至具有潜在的传播能力（图3）。2.4小鼠肺脏病理变化我们采用HE染色观察小鼠肺脏损伤程度，结果发现所有CIVs重组病毒都可以造成肺脏不同程度的病变，其中以LZ36、LZ45、QZ5和LZ56组小鼠肺脏损伤较为严重，主要以支气管坏死脱落、肺泡壁增厚、肺泡腔以及支气管内有大量的弥漫性浸润的单核细胞为主。对照组肺泡均匀，无萎缩或扩张，无充血或炎细胞浸润（HE染色-蓝紫色，图中黑色箭头所指）、巨噬细胞（HE染色-红色，图中蓝色箭头所指），见图4。毒株Strains简称Abbreviation基因片段GenesegmentsPB2PB1PAHANPNAMNSA/Canine/Guangxi/LZ317/2013(
【作者单位】： 广西大学动物科学技术学院;南宁市华波宠物医院;山东省农业科学院畜牧兽医研究所;
【基金】：广西自然科学基金回国项目(2015GXNSFCA139002);广西自然科学基金青年基金项目(2016GXNSFBA380219) 广西大学博士启动项目(XBZ160123) 山东省博士基金(BS2013SW022)
【分类号】：S855.3

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 ;流感病毒可能致命的秘密被发现[J];中国家禽;2001年22期

2 王均忠 ,Simon M.Shane;流感病毒的跨种感染[J];国外畜牧学(猪与禽);2002年05期

3 刘明,张云,杨涛;A型流感病毒反义遗传学研究进展[J];畜牧兽医科技信息;2004年01期

4 罗天海;Ian Brown;;猪正面临着禽型流感病毒的威胁[J];国外畜牧学(猪与禽);2006年06期

5 李世宏;梁纪兰;杨锐乐;严作廷;王东升;兰菁;;中药抗流感病毒研究进展[J];中兽医医药杂志;2007年05期

6 ;甲型H1N1流感病毒[J];饲料工业;2009年10期

7 ;A型流感病毒复制机理研究获进展[J];中国家禽;2013年08期

8 魏浩澈;季宏伟;徐志文;周远成;陈蕾;吴云飞;;A型流感病毒在猪群中的流行情况[J];养猪;2013年03期

9 苗凤源;;经鼻接种A型流感病毒对鼷鼠嗅粘膜的影响[J];国外医学.耳鼻咽喉科学分册;1987年02期

10 ;高温、紫外线等是流感病毒的克星[J];农村科学实验;2005年12期

相关会议论文 前10条

1 伍锐;段正赢;刘泽文;杨克礼;梁望旺;邓均华;周丹娜;田永祥;;A型流感病毒为载体的开发及其应用[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年

2 杜雄伟;李叶;杨卓;;A型流感病毒对小鼠致病机制的研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集（上册）[C];2009年

3 杨琴;张兴晓;杨灵芝;郭庆栋;;流感病毒在三种细胞中的生长对比[A];山东畜牧兽医学会禽病学专业委员会第一次学术研讨会论文集[C];2009年

4 高玉伟;夏咸柱;扈荣良;王立刚;刘丹;邹啸环;黄耕;贺文琦;;虎流感病毒的分离、鉴定、基因分析与抗体调查(摘要)[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集（下）[C];2003年

5 李叶;廖明;辛朝安;;A型流感病毒对小鼠致病机制的研究进展[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年

6 祝艳华;王雯慧;陈怀涛;;中药抗流感病毒作用的研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十五次、中国病理生理学会动物病生专业委员会第十四次学术讨论会论文集[C];2007年

7 刘晓玲;曹帅;贾晓娟;李晶;杨利敏;毕玉海;刘文军;;流感病毒蛋白的细胞核穿梭与病毒的复制[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会论文集[C];2012年

8 孙怡朋;杨俊;刘金华;;我国猪群中新甲型H1N1流感病毒生物学特性的研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会论文集[C];2013年

9 冉伟;孙艺学;朱利塞;丁壮;丛彦龙;;流感病毒种内与种间传播的影响因素[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会论文集[C];2013年

10 孙丹丹;包永占;史万玉;钟秀会;;中药抗流感病毒作用机制研究进展[A];纪念中国畜牧兽医学会中兽医学分会成立30周年中国畜牧兽医学会中兽医学分会2009年学术年会、华东区第十九次中兽医科研协作与学术研讨会论文集[C];2009年

相关重要报纸文章 前10条

1 ;新流感病毒可能已在猪身上悄悄传播多年[N];新华每日电讯;2009年

2 凌朔;新流感病毒家族的前世今生[N];新华每日电讯;2009年

3 曹斯;广东研制流感病毒“追踪器”[N];广东科技报;2013年

4 唐志强;甲型流感研究“重归原点”[N];新华每日电讯;2009年

5 本报记者;专家就防控宠物感染甲型H1N1流感病毒答记者问[N];农民日报;2009年

6 记者 何德功;新型流感病毒将在人与人之间蔓延？[N];新华每日电讯;2004年

7 本报驻美国记者 毛黎;警惕甲型H1N1流感病毒变异[N];科技日报;2009年

8 记者 张新生;南极企鹅身上发现流感病毒[N];科技日报;2009年

9 葛进;日本开发出鸡流感早期检测系统[N];农民日报;2009年

10 王金宝;牛妊娠期不容忽视流感病毒的危害[N];中国畜牧兽医报;2007年

相关博士学位论文 前10条

1 范文辉;犬Ⅲ型干扰素的功能特点及B型流感病毒NEP蛋白出核功能研究[D];广西大学;2015年

2 万志敏;抗体压下H9N2流感病毒囊膜糖蛋白关键抗原表位氨基酸的变异分析[D];扬州大学;2015年

3 孔晖晖;H7N9亚型流感病毒遗传演化分析及H7N9弱毒疫苗在哺乳动物模型上的免疫效力评价[D];中国农业科学院;2016年

4 于杨;宿主hnRNPC2在A型流感病毒感染过程中的作用机制研究[D];浙江大学;2016年

5 陈济铛;广东省猪群和执业人群流感病毒血清学调查及新型PICV载体流感疫苗免疫保护效果评价[D];华南农业大学;2016年

6 何赏;流感病毒H5N1亚型虎源株的生物学特性及溯源[D];南京农业大学;2015年

7 房家立;A型流感病毒感染诱导COX2基因表达机制研究[D];武汉大学;2011年

8 徐一鸣;流感病毒多亚型检测方法的研制和应用[D];吉林大学;2009年

9 朱紫祥;p53在I型干扰素介导的先天性抗甲型流感病毒中的作用研究[D];中国农业科学院;2013年

10 张守平;p-STAT1蛋白参与调节A型流感病毒的复制及炎性反应的研究[D];中国农业大学;2015年

相关硕士学位论文 前10条

1 孟慧芝;A型流感病毒条形码检测技术研究[D];山西农业大学;2015年

2 刘兵;SPF鸡与BALB/c小鼠体内流感病毒唾液酸受体组织分布的差异性分析[D];中国农业科学院;2015年

3 王静;HD-11细胞感染H9N2流感病毒后先天性免疫相关基因mRNA表达变化的研究[D];西北农林科技大学;2015年

4 李朋;貂源H9N2亚型流感病毒的分子生物学特性及其致病性研究[D];山东农业大学;2015年

5 王倩;苦参主要成分的分离提取及其抗犬流感病毒的研究[D];山东农业大学;2015年

6 邵信媛;应用酵母双杂交系统筛选与流感病毒NS2蛋白相互作用的宿主蛋白[D];甘肃农业大学;2015年

7 赵苗苗;广东省H3N2亚型犬流感血清流行病学调查和病毒的分离、鉴定及遗传进化分析[D];甘肃农业大学;2016年

8 姜颖越;重组hIFITM3腺病毒的构建及抗流感病毒作用研究[D];延边大学;2016年

9 马树杰;NA蛋白对流感病毒受体结合特性的影响及鸭源H7N9流感病毒生物学特性的研究[D];中国农业科学院;2016年

10 李国利;eIF4A3对流感病毒复制的影响及其作用机制研究[D];华中农业大学;2016年

本文编号：2530761