【摘要】：禽网状内皮组织增生症病毒(REV)和禽白血病病毒(ALV)是禽的两种逆转录病毒,它们不仅能够让感染鸡群发生肿瘤并引起免疫抑制,还常常因为通过种鸡群的垂直传播而引起种鸡群和商品代鸡群之间的纠纷。此外,由于这两种病毒均可以通过种蛋垂直传播,继而成为禽的弱毒疫苗中报道最为频繁的外源病毒污染物。本研通过对十种地方品系鸡群中ALV和REV感染进行了血清学调查,并利用多种方法对其所使用的多批疫苗进行了针对REV和ALV的检测,并试图解析不同鸡群高抗体阳性率与疫苗中ALV和REV污染之间的关系。1.分别应用商品化的ELISA抗体检测试剂盒和间接免疫荧光反应(IFA)对来自于十种地方品系鸡群的1500份血清样品进行针对REV、ALV-A/B、ALV-J抗体的检测,结果显示不管应用哪种方法,三种病毒的抗体阳性率均处于相对较高的水平,针对REV、ALV-A/B、ALV-J抗体检测阳性率分别为17.3%—100%,8.0%—59.3%,4.0%—16.0%。IFA和ELISA两种方法吻合性较好,总体上经ELISA鉴定为阳性的血清样品经过IFA复核检测也均为阳性,但是某些经ELISA检测其读数的OD值在临界值附近的血清样品经IFA检测可见典型的绿色荧光,也可判定为REV抗体阳性,该结果显示IFA灵敏度更高一些,但是在进行大批量的样品检测时IFA相对较为繁琐,不适于群体的评估,但可以作为对ELISA检测的复核检验和补充。2.将不同种鸡群使用的新城疫病毒(NDV)灭活疫苗、H9亚型禽流感病毒(AIV-H9)灭活疫苗、鸡马立克氏病毒(MDV)弱毒疫苗、禽痘病毒(FPV)弱毒疫苗、NDV弱毒疫苗、鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)弱毒疫苗分别按照中国兽药典要求接种SPF鸡后35d和42d检测针对REV、ALV-A/B、ALV-J的抗体,检测结果显示在四种弱毒疫苗中抗体均为阴性,但是在某些批次的新城疫病毒(NDV)灭活疫苗中能够检测到REV,该结果显示制备该批次的疫苗所用的鸡胚可能存在着REV的污染,这可能可以解释为何在一些鸡群中REV抗体阳性率较高但不发病的原因。在每种疫苗中分别人为的污染了高剂量组和低剂量组的REV和ALV,对四种弱毒疫苗同时分别用常规RT-PCR、PCR结合核酸探针斑点杂交技术进行针对REV和ALV污染的检测,结果显示PCR结合核酸探针斑点杂交技术检测可以检测到所有人为污染低剂量的REV和ALV,而常规RT-PCR检测仅可以检测到高剂量组的REV和ALV。这两种方法针对不同批次的四种疫苗检测结果均为阴性,与接种SPF鸡的检测结果是一致的。
【学位授予单位】：山东农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S858.31
【参考文献】
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